针刺对胃运动低下大鼠孤束核神经元放电影响探究.docVIP

针刺对胃运动低下大鼠孤束核神经元放电影响探究摘要：目的：探讨迷走神经中枢孤束核在针刺“足三里”、“内关”、“中脘”、“气海”调节胃运动中的作用机制。方法：采用神经电生理学方法，用微电极细胞外记录大鼠孤束核单个神经元的活动，在正常生理状态下及经血管注射抑制胃运动的药物阿托品后，观察针刺“足三里”、“内关”、“中脘”、“气海”对孤束核神经元放电的影响。结果：在正常生理状态下，针刺“足三里”、“内关”、“中腕”、“气海”均有效激活了孤束核神经元放电。静脉注射阿托品后，孤束核神经元背景放电减少，但针刺对放电的影响与药物前相比，变化不大，阿托品后针刺“足三里”、“内关”、“中脘”、“气海”仍明显激活了孤束核神经元放电。结论：针刺“足三里”、“内关”、“中脘”、“气海”对胃运动的调节作用可能是通过激活延髓内与内脏传入信息相关的中枢核团神经元而实现的。 关键词：神经元放电；孤束核；胃运动；针刺 中图分类号：R－33　文献标识码：A　文章编号：1673－7717(2007)09－1820－03 孤束核(nucleus of solitary tract，NTS)是脑干内接受胸腹腔内脏初级感觉传人信息的主要核团，在调节内脏器官活动中起重要作用。笔者采用神经电生理学方法，用微电极细胞外记录大鼠孤束核单个神经元的活动，在正常生理状态下及经血管注射抑制胃运动的药物阿托品后，观察针刺“足三里”、“内关”、“中脘”、“气海”对孤束核神经元放电的影响，探讨“足三里”、“内关”、“中脘”、“气海”与胃的延髓初级中枢联系机制，为临床治疗提供理论依据。 1 材料与方法 1．1　实验动物 健康成年Sprague－Dawley雄性大鼠30只，体重300－350g之间，中国中医科学院实验动物中心提供，为清洁级动物。测量胃内压实验前禁食12h，饲以5％葡萄糖盐水。手术及实验过程中动物体温用计算机温度时间控制仪维持在(37±1)℃。 1．2　仪器及药品 脑立体定位仪(日本)、微电极操纵器、微电极推进器(PF5－1，日本光电)、微电极放大器(MEZ－8301，日本光电)、载波放大器(AP－601G，日本光电)、生物放大器(AB－621G，日本光电)、双线记忆示波器(Vc－10，日本光电)、刺激器(SEN－7203，日本光电)、隔离器(SS102J，日本光电)、双芯玻璃毛坯(长度100mm，外径1.5mm，内径1.2mm，南京)、玻璃微电极拉制仪(Model P－97，美国)、压力换能器(yp200，北京)、PowerLab计算机数据采集系统(爱德公司，澳大利亚)、华佗牌针灸针具(苏州)、计算机温度时间控制仪(STARC ST－360，日本)、台式牙钻车(307－6，上海)、37℃液体石蜡、0.5M滂胺天兰醋酸钠溶液、0.2％肝素、0.01％阿托品、0.3％中型红水溶液。 1．3　手术 1．3．1　孤束核细胞外记录手术　在室温条件下，大鼠称重后，用10％乌拉坦腹腔注射麻醉(urethane，1.0－1.2g／kg)。大鼠头部用耳棒固定，头顶部剃毛，沿正中矢状线切开皮肤，分离皮下组织，刮除骨膜，暴露前后囱，将前后囱调至同一水平。根据大鼠脑立体定位图谱(Paxinos和Watson，1998)，在孤束核(A－11.3－14.3mm；L0－2.3mm；H 4－7mm)所在颅骨部位用台式牙钻车钻孔，手下有落空感即停止。显微镜下分层剥离硬脑膜和软脑膜，暴露的脑组织用温的石蜡油覆盖。在记录孤束核实验中，大鼠俯卧，将大鼠头部用耳棒固定于脑立体定位仪上，下齿钩挂在鼠头夹中，口鼻部用鼠头夹压紧。 1．3．2　血压记录手术　动物仰卧，于颈部中线偏左侧一字切口切开皮肤，分离皮下组织和肌肉，暴露左侧颈静脉、颈总动脉。用动脉夹在颈总动脉中段夹住血管阻断血流，注意松紧适度以免夹伤血管。将颈静脉、颈总动脉的远心端用手术线结扎，眼科剪将血管剪开一斜口(大约为直径的1／2)，将静脉插管和动脉插管分别向心性插入颈静脉、颈动脉内约8－10mm，注意不能太深以避免动脉插管对颈动脉窦的机械刺激。动脉插管内预先充满0.2％的肝素，排除悬浮气泡。动脉插管通过三通装置与注射器和压力传感器相联，注射器内留置2mL 0.2％的肝素，动脉血管堵塞时少量推注。静脉插管直接与注射器相连，以备静脉用药。 1．3．3　胃内压记录手术动物仰卧，上腹部剃除毛，于剑突下腹正中矢状线偏左侧5nma一字切口切开腹腔，温和的生理盐水纱布推开肝脏暴露胃幽门部及十二指肠上段。将避孕套套在塑料导管一端，导管前端与避孕套之间留有一定空隙，在距离避孕套前端1 mm处用外科线结扎将两者固定，制成直径为20 mm的胃内留置气囊。胃囊内及插管内充满双蒸水，排除气泡。在十二指肠距胃窦部1.5－2