高效液相色谱法测定鼻渊通窍颗粒中盐酸麻黄碱含量.docVIP

高效液相色谱法测定鼻渊通窍颗粒中盐酸麻黄碱含量摘 要 目的：建立用HPLC法测定鼻渊通窍颗粒中麻黄碱含量的方法。方法：使用phenomenex C18柱(4.6mm×250mm，5μm)。流动相：乙腈-0.1%，磷酸(9∶87)，流速1.0ml/分，检测波长210nm。柱温25℃。结果：该法线性关系良好(r=0.9998)，平均回收率为104.18%，RSD=2.32%(n=5)。结论：本方法易于操作，灵敏，重复性好，可用于鼻渊通窍颗粒的质量 控制和评价。 关键词 鼻渊通窍颗粒 HPLC 麻黄碱 仪器与试剂 SP8800高效液相泵、Sepctra Focus紫外检测器、HP色谱数据工作站、盐酸麻黄碱对照品(由中国药品生物制品检定所提供)；鼻渊通窍颗粒（市售，批号：060412，060515，060710）、乙腈、磷酸为分析纯等。 方法与结果 色谱条件：色谱柱为phenomenex C18柱(4.6mm×250mm，5μm)。流动相：乙腈-0.1%，磷酸(9∶87)，流速1.0ml/分，检测波长210nm。柱温：25℃。 对照品溶液的制备[1]：精密称取盐酸麻黄碱对照品10.13mg，置100ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取2ml，置25ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，则每1ml含盐酸麻黄碱8.1μg。 供试品溶液的制备[2]：精密称取本品约2.5g，研细，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇溶液40m1，称定重量，超声处理45分钟，冷却，再称定重量，用甲醇溶液补足失重，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液移取1ml，加到中性氧化铝柱上，用50％甲醇溶液洗脱至10ml量瓶中至9ml，加1滴磷酸，用50%甲醇溶液稀释至用刻度，摇匀，0.45μm滤膜滤过，作为供试品溶液。 线性关系考察：依次吸取1、5、10、15、17μl对照品溶液注入高效液相色谱仪，以进样量(x)为横坐标，色谱峰面积(y)为纵坐标，求得回归方程：y=4763.3x-5826.2,r=0.9999。表明进样量在0.081～0.138μg范围内线性关系良好。 精密度实验：精密吸取上述供试品溶液10μl，重复进样5次，按上述色谱条件测定，记录峰面积。计算得RSD=0.47%(n=5)。 稳定性实验：精密吸取上述供试品溶液10μl，分别在放置0、2、4、6、12、24小时进样，按上述色谱条件测定盐酸麻黄碱的峰面积，计算得RSD=0.50%(n=6)，结果表明，供试品溶液在24小时内稳定。 重现性实验：精密称取同一批次样品5份，按上述方法制备供试品溶液，按上述色谱条件测定盐酸麻黄碱的含量，计算得RSD：0.98%（n=5）。 加样回收率实验：称取已测得盐酸麻黄碱含量的样品约2.5g，精密称定，分别精密加入盐酸麻黄碱对照品1mg，测定盐酸麻黄碱含量，结果平均回收率为104.18%，RSD：2.32%（n=5）。 成品的含量测定：分别称取不同批号的鼻渊通窍颗粒0.1g精密称定，按上述方法制备供试品溶液,分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl,注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件测定，以面积外标法计算盐酸麻黄碱含量,结果见表1。 讨 论 鼻渊通窍颗粒以辛夷、苍耳子（炒）、麻黄、白芷、薄荷等14味主药配伍组成, 具有疏风清热，宣塞通窍之效。 麻黄碱是麻黄药材中的主要活性成分，用HPLC法检测鼻渊通窍颗粒中麻黄碱含量，易于操作，准确可靠，重现性好，能有效控制麻黄配方颗粒的质量。为进一步使供试品液纯化，提高分离度，经多次试验，采用液超声方法提取供试品液，本法是提取该制剂中麻黄碱的较好方法。 参考文献 1 周斌，高文远，等.麻黄配方颗粒制备工艺和质量标准研究.中药材，2006，29. 2 国家药典编委会.中华人民共和国药典.一部.北京：化学工业出版社，2005：224. 1