黄芪注射液穴位注射对慢性盆腔炎大鼠SIgA及细胞因子影响.docVIP

黄芪注射液穴位注射对慢性盆腔炎大鼠SIgA及细胞因子影响摘要：目的：观察黄芪注射液穴位注射对慢性盆腔炎大鼠局部slgA，血清IL-6、TNF-a含量的影响及其病变局部组织形态学变化，探讨黄芪注射液穴位注射疗法对慢性盆腔炎免疫功能影响。方法：将wistar大鼠随机分成7组，除正常组和假手术组外，其余采用20％苯酚胶浆0.1mL注入大鼠左侧子宫造成慢性盆腔炎模型，黄芪注射液穴注组和生理盐水穴注组选用关元、足三里进行穴位注射；黄芪注射液肌注组用等量药物在大鼠两侧臀大肌处肌注；药物对照组用妇科千金片灌胃。观察各组大鼠子宫局部的组织形态学变化，检测阴道冲洗液中S―IgA的含量及血清中IL-6、TNF-a的含量。结果：黄芪注射液穴位注射可以有效地增加慢性盆腔炎大鼠模型宫颈及阴道SIgA的含量，提高局部的免疫能力；同时可以抑制血清中IL-6、TNF-a的过度分泌，对细胞因子的异常表达有一定的调节作用，跟同穴注射生理盐水、同药肌注相比具有优势。结论：慢性盆腔炎的发生与局部SIgA分泌不足、区域免疫功能下降及细胞因子的异常分泌有关；黄芪注射液穴位注射可以对以上方面起到一定的调节作用，并且显示出药穴结合的优势疗效。 关键词：盆腔炎性疾病；穴位注射；黄芪注射液；免疫力 中图分类号：11285.5　文献标识码：A　文章编号：1673-7717(2007)11-2321-04 现代研究证实中药黄芪和腧穴足三里、关元均具有明显的免疫调节功能，而慢性盆腔炎存在局部免疫功能紊乱、抵抗力下降的情况，导致其反复发作、迁延难愈。在临床研究中发现用黄芪注射液穴位注射足三里、关元等穴治疗慢性盆腔炎具有较好的疗效，现建立慢性盆腔炎大鼠模型，进一步观察本疗法对大鼠模型免疫功能及病理形态学改变的影响。 1　材料和方法 1.1　材料 1.1.1 实验动物Wistar雌性大鼠，体重180～200g，60只，中国科学院上海实验动物中心提供，饲养于浙江中医药大学实验动物中心。 1.1.2　试剂和药物黄芪注射液，10mL／支，成都地奥九泓制药厂生产，产品批号：0408054；妇科千金片，3.4g生药／片，湖南株洲千金药业有限公司生产，产品批号：9812004。20％苯酚糊剂，用1％CMC―Na作溶剂，使用时摇匀。 1.2　方法 1.2.1　造模采用目前最常用的苯酚胶浆法：戊巴比妥钠(浓度为3％)腹腔注射麻醉大鼠(0.15mL／100g)，待麻醉生效后，用橡皮筋牵拉四肢固定于操作台上，无菌条件下取大鼠下腹正中切口约0.8～1cm，开腹后暴露并固定子宫，用4号针头选取左侧子宫在其分叉处小心进针，向卵巢方向缓慢注入20％苯酚胶浆0.1mL，假手术组注入相同剂量的无菌生理盐水，注毕，分层关腹，消毒术区。 1.2.2　动物分组和处理大鼠适应性饲养1周后编号，用抽签的方法随机抽取其中8只作为正常组，8只为假手术组，其余造模。造模15天后随机抽取其中3只解剖，显示造模成功后，将造模大鼠分成模型组、黄芪针穴注组、妇科千金片组、生理盐水穴注组；正常组、假手术组、模型组正常饲养，不做任何处理；黄芪穴注组和生理盐水穴注组选取关元、足三里(双)进行穴位注射，每穴0.12～0.13mL，隔日1次；妇科千金片组灌胃给予妇科千金片悬液，配药浓度10％，给药剂量3.0／kg，1次／d，给药剂量均相当于成人每千克体重每日用量的20倍；造模20天后开始治疗，各组于治疗、饲养1个月后检测指标。 1.2.3　大体形态观察肉眼观察左侧大鼠子宫的大体形态变化，根据每例子宫与周围组织的粘连、子宫壁充血、官腔狭窄、积液、炎性包块及对右侧子宫的影响6种情况，由轻到重评分为0、1、2、3分，累计每组动物炎症评分，并计算出平均数±标准差(x±s)，分值越高提示慢性炎症程度越重。 1.2.4　光镜下病理学观察取大鼠右侧子宫置于10％福尔马林溶液中固定，48h后取出，切取组织块2mm左右厚度，制作病理组织切片，程序按常规脱水、透明、包埋、切片、HE染色进行，光学显微镜下镜检，摄取照片。 1.2.5　sIgA的检测取大鼠阴道冲洗液，采用放射免疫法测定，试剂盒购于北京原子高科技术应用股份有限公司，仪器采用中国同位素公司生产的r计数仪，具体操作按试剂盒说明书进行。 1.2.6　TNF-a IL-6的检测腹静脉取血，-4℃低温离心机(3000r／min)分离血清，采用放射免疫法测定，试剂盒购于解放军总医院科技开发中心，仪器采用中国同位素公司生产的r计数仪，具体操作按试剂盒说明书进行。 1.3　统计学方法 采用SPSS11.0软件做统计处理，实验结果用均数±标准差(x±s)表示，多组间比较用一维方差分析(F检验)，组间两两比较用q检验，P0.05)；其它各