黄芪失笑散抗心肌缺血实验探究.docVIP

黄芪失笑散抗心肌缺血实验探究摘要：目的：观察黄芪失笑散对结扎大鼠心肌缺血及缺氧缺糖心肌细胞的保护作用。方法：用冠脉结扎大鼠法及乳鼠心肌细胞原代培养法观察黄芪失笑散对CK―MB、cTNI含量的影响。结果：黄芪失笑散各剂量组的CK-MB、cTNI含量明显低于模型组(P0.05)，但各治疗组之间的疗效存在着一定的趋势，依次为黄芪失笑散加消心痛组、消心痛组、黄芪失笑散大剂量组和小剂量组。 3.2　原代培养乳鼠心肌细胞的形态学观察在倒置显微镜下观察，培养4～24h后，心肌细胞开始贴壁生长，初为圆 形，后为梭形，偶见单个细胞开始搏动，继而细胞逐渐在瓶壁表面铺展；随后细胞不断分裂、增殖，数量逐渐增多，形成不规则的星形，细胞铺赓状况更加明显，并伸出伪足。在培养第3～4天，伪足可相互接触交织成网，形成细胞单层或细胞簇，呈放射状排列的同心圆状，其搏动同步化，形成所谓功能性合体细胞。可见心肌细胞占95％以上。 3.3　黄芪失笑散对缺氧缺糖心肌细胞上清液CK-MB cT－NI的影响表2研究表明，缺氧1h后，取各组细胞上清液测得CK－MB、cTNI结果显示，模型组显著高于正常对照组(P，其中，消心痛组、黄芪失笑散加消心痛组、黄芪失笑散各剂量组之间比较无统计学意义(P0.05)，黄芪失笑散大、中、小剂量组无明显剂量依赖性(P0.05)，但大剂量组疗效不及小剂量组，3次结果均相似。 3.4　黄芪失笑散对缺氧缺糖前后心肌细胞的形态学变化的影响原代培养的心肌细胞单层或成簇生长，细胞与细胞之间结合紧密；缺氧培养1h后，大部分细胞脱落、死亡，镜下所见贴壁生长细胞较少，搏动消失；消失痛组和黄芪失笑散加消心痛组心肌细胞缺氧1h，后细胞收缩，部分细胞死亡、脱落，有部分缓慢搏动，且不同步；黄芪失笑散大、中、小剂量组心肌细胞缺氧1h后细胞形态基本正常，大部分细胞仍正常贴壁生长，且能同步搏动，其中以黄芪失笑散小剂量组最好。表明黄芪失笑散可显著提高心肌细胞耐缺血性损伤的能力。 4　讨论 冠心病属于中医学的“胸痹”、“胸痛”、“真心痛”、“厥心痛”范畴，其病因病机是一种本虚标实证候，本虚多为气虚，标实多为血瘀，临床上多见于气虚血瘀型。黄芪失笑散由黄芪、五灵脂、蒲黄组成，大量的研究资料证明：中药益气活血剂有显著增强心肌收缩力，降低心肌耗氧量；扩张冠脉，对抗心肌缺血；改善心肌微循环，降低血脂，抑制血小板聚集，增强体内纤维蛋白溶解酶活性，对心肌缺氧有保护作用，增强机体对缺氧的耐受力；能有效提高缺血心肌的抗氧化能力。方中黄芪味甘，性温，归脾肺经，是补气中的要药。现代药理研究表明，黄芪能显著增加心排出量，有正性肌力作用；可保护心肌细胞的超微结构，改善心肌细胞代谢，减少缺氧心肌细胞凋亡及损伤；还可拮抗肾上腺素，扩张冠脉、改善心肌血供，降低血液黏稠度，消除自由基及提高机体免疫力等。失笑散是历代活血化瘀代表方剂之一，现代医学研究，其具有提高机体免疫力，抗缺氧，抗心肌缺血，抗炎止痛，降低全血黏度、血浆黏度，降低红细胞压积值，延长凝血及血栓形成时间的作用。全方以补益心脾之气为本，活化心胸之瘀滞为标，标本同治，虚实兼顾，以补不可滞邪、通不可伤正为目的，从而使瘀血祛，心气足，则血脉通。 本实验用于冠脉结扎动物实验部分大鼠共63只，其中饲养、灌胃过程中死亡1只，最后用于假手术组6只均未死亡，与文献报道一致。手术24h内死亡24只，死亡率为42.86％，符合国内外文献报道。心肌在发生缺血或梗塞时，代谢亦出现紊乱，导致心肌细胞内多种酶释放入血，进而加重缺血对心肌的损伤。TNI是目前发现对心肌损伤诊断特异性和敏感性最高的标志物之一，血清CK-MB活性的变化则可作为心肌缺血损伤程度和范围的客观指标。故本实验选用测定血清及细胞上清液中CK-MB、cTNI活性变化，来作为评价心肌细胞损伤程度的重要指标。本实验结果显示，黄芪失笑散大、中、小剂量组均可显著降低血清及细胞上清液CK-MB、cTNI水平，表明其具有较好的抗心肌缺血作用。 总结实验可以得出：黄芪失笑散可以起到保护心肌缺血的作用。 1