雌激素和孕激素对体外培养奶牛破骨细胞增殖分化影响.pdf

雌激素和孕激素对体外培养奶牛破骨细胞增殖分化的影响 摘要 目的：观察不同浓度雌激素、孕激素对体外培养的破骨细胞增殖分化的影响。 方法：无菌取出新生奶牛的股骨用机械分离酶消化结合法获取破骨细胞，进行 为试验模型，将用含1096胎牛血清的DMEM培养液配制的不同浓度的雌激素、孕激素 与破骨细胞共同培养，采用MTT法观察雌激素、孕激素对破骨细胞增殖功能的影响 (用波长450处oD值表示)及奶牛破骨细胞的生长曲线，用抗酒石酸酸性磷酸酶测 试盒测定雌激素、孕激素对破骨细胞分化的影响(用抗酒石酸酸性磷酸酶活性表示)。 结果：采用机械分离酶消化结合法获得的细胞具有典型破骨细胞的形态特征， 细胞经抗酒石酸酸性磷酸酶染色呈阳性且阳性率达92％，Giemsa染色有空泡显示， 符合破骨细胞的生物学特性，表明培养的细胞为高纯度的破骨细胞。加雌激素、孕 激素培养后测定细胞增殖结果显示：不同浓度的雌激素、孕激素均能抑制破骨细胞 激素对雌激素有协同促进作用。雌激素、孕激素对奶牛破骨细胞的抑制增殖作用还 存在时间一效应关系，随着时间的延长，吸光度值下降，至第7d，吸光度值最低， 到第8d，吸光度值有所上升。不同浓度的雌激素、孕激素均能抑制破骨细胞的分化， 但与对照组比较差异不明显(PO．05)。 雌激素和孕激素对体外培养奶牛破骨细胞增殖分化的影响 结论：雌激素、孕激素能抑制体外培养的破骨细胞增殖，且存在剂量一效应和时 间一效应关系；孕激素对雌激素有协同促进作用；雌激素、孕激素均能抑制破骨细胞 分化。雌激素、孕激素通过抑制体外培养的破骨细胞增殖及分化，从而抑制骨吸收。 关键词：雌激素；孕激素；破骨细胞；增殖分化；抗酒石酸酸性磷酸酶 2 雌激素和孕激素对体外培养奶牛破骨细胞增殖分化的影响 ABSTRACT observetheeffectof and onthe and obiective：To EstrogenProgesteroneproliferation differentiationofmill【cowcuLturedosteoclastsinvitro． Methods：To obtainosted)clastsfromneonatalmilkcow’sfemur themethodof adopting mechanical and 11 was as separationenzymatic c Lture，ittook digestion,conductprimary the modelaftersome then cULturethese experimental idenifieations，and respectively cellswithdifferent concentrationsofthe and was EstrogenProgesteronetogetjer．It measuredonthefunctionofcell and curveMTT proliferationgrowthby method(OD at value ofcelldifferentiationwasmeasured