18O稳定同位素标记定量蛋白质组研究技术的建立与优化.pdfVIP

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2017-08-28 发布于北京
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第 35卷分析化学 FENXIHUaXUE 研究报告第 2期 2007年 2月 ChineseJournalofanalyticalChemistry 161~165 ………………… … … ! # $ … … ………………… 180稳定同位素标记定量蛋自质组研究技术的建立与忧化 1! 2!3 1!2 1!2 1!2 钱林艺应万涛刘新卢庄 1!2 3 ＊1!2 蔡耘何建勇钱小红 1 100850 北京放射与辐射医学研究所北京 2 102206 3 110015 北京蛋白质组研究中心北京沈阳药科大学沈阳 180 摘要建立了稳定同位素标记方法用于复杂体系蛋白质相对定量分析对影响蛋白质标记稳定性的实验条件进行了比较和优化结果表明采用酶切后标记的方法酶切肽段在胰酶催化下在 pH5.0 的 18 KHP0/KHP0缓冲体系中 37C 0标记反应 16 h 绝大部分肽段即可达到 100%的标记效率对多个 2 4 2 4 16 18 18 0/0成对肽段峰强度的动态范围及定量准确度进行了考察结果表明 0标记方法是一种简便稳定可靠 16 180 的相对定量方法 10借动态范围内标记率相对标准偏差在 18.4%以内 0/ 峰强度呈很好的线性关系本实验考察了标记后的肽段在不同溶液体系中的稳定性为复杂样品的预处理和预分离的溶液条件提供了依据 18 0 关键词稳定同位素标记定量蛋白质组学质谱液相色谱 1 引言