五、极地极端微生物的生物多样性及潜在应用价值评估 - 中国极地科学 .doc

项目名称：乔治王岛地区低温微生物科技部基础平台条件项目— 极地极端微生物的生物多样性及潜在应用价值评估 （本项目符合中国极地科学中长期发展规划的优先发展领域） 现场执行人： 陈 波 中国极地研究中心 （越冬考察） 周明扬 山东大学生命科学院微生物技术国家重点实验室（越冬考察） 考察背景： 南极地区各类生境微生物推动着陆地和海洋系统的氧、碳和其它必需元素的循环。它们长期适应极地极端寒冷和干燥、强烈辐射变化等特殊环境，在湖泊、海洋、沉积、土壤及其冰冻环境中形成了各种代谢水平和分子水平的适应机制，同时存在与其他物种间的协同或拮抗等相互作用机制，其生存环境的特殊性和多样性造就了他们经过长期适应形成的丰富的物种多样性、代谢多样性和遗传多样性，并在生理/代谢适应和代谢产物上表现独特的多样性。生活在南极特殊生境中的微生物蕴涵着生命进化历程的丰富信息，代表着生命对于环境的适应能力，是生物遗传和功能多样性非常丰富的资源宝藏。 乔治王岛地区为地处南纬62°左右的岛屿地形，气候条件相对南极大陆偏暖而降水丰富，动植物区系比较丰富，过去若干年来零星的微生物学调查和分析表明该地区的土壤、植被和近岸海洋微生物多样性较高，物种资源丰富是该地区的重要区系特征，本项目将结合我国极地科学中长期发展规划，综合开展该地区湖泊、鸟类栖息地、植被土壤、潮间带、近岸海洋沉积环境和海洋生物共附生环境等特殊生境的微生物多样性、基因资源多样性、产物多样性方面开展系统调查并在系统生物活性方面开展功能评价和分析。 南极低温微生物资源的调查和研究多年以来一直是国际学术界高度关注的问题，也是ATCM体系在国际条法领域一直存在争议的重要领域。由于南极微生物资源背后存在重大的经济利益、技术权益的竞争，发达国家特别是其中的主要南极考察国家近年来加快了该领域的调查和技术投入。我国在该领域的发展时间不长但认知水平不断提高，需要在资源、技术层面采取有效措施推动我国的南极生物资源和生物技术领域发展，为我国南极的科学、技术和外交权益服务。 考察内容 （1）南极乔治王岛地区湖泊环境微生物多样性调查与宏基因组文库的构建 依托中国南极长城站的实验室及其后勤支持系统，利用冬季湖泊结冰后以冰钻开孔及夏季湖泊作业平台（极地中心专门设计制作），开展法尔兹半岛地区燕鹅湖、银镜湖、长湖、团结湖、格鲁玻科、月牙湖等8-10个湖泊的水体和湖相沉积物样品的采集，实施湖泊环境基于16S rDNA分子序列分析的微生物多样性研究、可培养微生物的现场分离和纯化，并选择1-2个沉积层较厚、微生物数量和组成垂直分布差异显著的沉积样品进行全基因组DNA提取，结合长城站实验室的条件和国内实验室的后续分析技术实现微生物多样性分析及构建宏基因组文库。现场分离培养的纯株分别按4℃和-80℃保藏，运回国内实验室后将按照微生物菌株资源技术规范进行标准化整理，纳入科技部基础平台条件计划的国家E平台数据库。 （2）鸟类栖息地/植被/土壤环境微生物资源与多样性调查 采集乔治王岛地区具有典型生境特征的鸟类栖息地/植被/土壤等环境样品，采用非培养方法（culture-independent）开展微生物多样性研究，同时采用多套培养基组合分离其中的可培养菌株，分别按4℃和-80℃保藏，运回国内实验室后将按照微生物菌株资源技术规范进行标准化整理，纳入科技部基础平台条件计划的国家E平台数据库。 微生物主要野外采样设备：全部由极地中心备带，主要包括： 湖相沉积专用柱状采样器、小型重力管采样器、MARK II冰芯钻、汽机油动力JIFFY冰钻、采水器、小型底拖网具等 利用湖相沉积专用柱状采样器和/或小型重力采样器夏季使用特制的湖泊采样作业平台/冬季以冰钻开孔后采集湖相沉积柱样品，现场快速分样并无菌包装带回站。 利用小型重力采样器和/或小型抓斗采集长城站临近水域的浅海和潮间带沉积物样品，现场快速分样并无菌包装带回站； 利用采水器采集近岸海水和湖水样品，以预先灭菌的样品瓶分装带回站处理； 利用插管方法采集鸟类栖息地/冻土/植被下土壤样品，现场分装带回实验室； 利用小型底托网具采集潮间带和浅海底栖动植物样品，以预先灭菌的样品瓶或袋装容器分装带回站处理； 在长城站实验室利用若干组合培养基和无菌操作设备开展上述样品的分离培养和纯化操作；全基因组DNA样品由预先准备的制剂盒按规程操作提取，样品4℃冷藏或-80℃超低温保藏；样品的细菌多样性信息将通过后续的16S rDNA分析获得。 长城站实验室装备：根据十五能力建设项目的建设计划，26次对将长城站实验室的内部结构和功能设备进行全面的安装调试和运行，主要包括：：实验室操作台架结构件的安装、低温生物培养室的安装调试和运行、无菌操作设备/低温超低温保藏设备/培养设备/显微观察设备/基础光谱设备/定量称量和样品处理制备设备/监测配套设备/部