生理生化实验常用试剂【自己整理】.docxVIP

培养基LB液体培养基：胰化蛋白胨：1％，酵母抽提物：0.5％，NaCl：1％，pH7.5LB固体培养基：在LB液体培养基中加入1.5％的琼脂粉YPD液体培养基：酵母抽提物：1％，蛋白胨：2％，葡萄糖：2％，pH自然YPD固体培养基：在YPD液体培养基中加入1.5％的琼脂粉完全极限省却成分培养基（CM）：YNB：0.67％，葡萄糖：2％，其中含（mg/L）：苏氨酸150 酪氨酸30 缬氨酸150赖氨酸30 谷氨酸100 丝氨酸150天冬氨酸100 甲硫氨酸20 苯丙氨酸50异亮氨酸30 精氨酸20其它营养成分（mg/L）：腺嘌呤50 尿嘧啶50 组氨酸100亮氨酸100 色氨酸100省却特定的氨基酸成分，液体培养基pH5.6，固体培养基加1.5％的琼脂粉，pH6.510×YNB（13.4%酵母氮源，含硫酸铵不含氨基酸）：溶解13.4gYNB于100mL水中，过滤除菌，加热至YNB完全溶解，存于4℃。500×B（0.02%生物素）：溶解20mg生物素于100mL 水中，过滤除菌，放于4℃。100×AA（0.5%各种氨基酸）：溶解各50mg L-谷氨酸，L-蛋氨酸，L-赖氨酸，L-亮氨酸，L-异亮氨酸于100mL 水中，过滤除菌，存于4℃。10×D（20%葡萄糖）：溶解200g D-葡萄糖于1 000mL水中，高压灭菌15min。500×生物素(0.02%)：溶解20mg生物素于100mL水中，过滤除菌，放于4℃，可放1年。100×H（0.4%组氨酸）：溶解400mg L-组氨酸于100mL水中，低于50 度加热以促溶解，过滤除菌，可放1年。10×D（20%葡萄糖）：溶解200g D-葡萄糖于1 000mL水中，高压灭菌15min或过滤除菌，可放1年。10×M（5%甲醇）：混合5mL甲醇与95mL水，过滤除菌存于4℃，可放2个月。10×GY（10%甘油）：混合100mL甘油与900mL 水，过滤或高压灭菌，室温放置，可存放1年以上。100×AA（0.5%各种氨基酸）：溶解各50mg L-谷氨酸，L-蛋氨酸，L-赖氨酸，L-亮氨酸，L-异亮氨酸于100mL水中，过滤除菌，存于4℃，可放1年。1mol/L磷酸钾缓冲液 pH6.0：32mL 1mol/L K2HPO4，868mL 1mol/L KH2PO4，调整pH值为6.0±0.1（如果需调pH值，用磷酸或KOH）。过滤或高压灭菌，室温下可放1年以上。100mg/mL遗传霉素：用无菌水制备30mL 100mg/mL 遗传霉素贮存液，过滤除菌，存于-20℃。用来制备含不同终浓度遗传霉素平板：0.25，0.5，0.75，1.0，1.5，1.75，2.0，3.0，4.0。LB培养基：5%酵母提取物，10%胰蛋白陈，10%NaCI，pH7.0；YPD培养基：1%酵母提取物，2%胰蛋白膝，2%葡萄糖；RDB固体培养基：lmol/L山梨醇，l%葡萄糖，1.34% Yeast Nitrogen Base with Ammonium Sulfate with amino acids(YNB)，0.00004%Biotin，0.005%谷氨酸，0.005%甲硫氨酸，0.005%赖氨酸，0.005%亮氨酸，0.005%异亮氨酸，1.5%琼脂；MM固体培养基：1.34%YNB，0.00004%Biotin，0.05%甲醇，1.5%琼脂；MD固体培养基：1.34%YNB，0.00004%Biotin，2%葡萄糖，1.5%琼脂；BMGY培养基：1%酵母提取物，2%蛋白陈，100mmol/L磷酸缓冲液(pH6.0)，1.34% YNB，0.00004% Biotin，l%甘油(V/V)；BMMY培养基：除以0.5%甲醇代替甘油，其余成分与BMGY相同。YPD-遗传霉素平板：1%酵母浸出物，2%蛋白胨，2%葡萄糖，2%不同量的遗传霉素4.0，250mL（8-10个遗传霉素平板）。主要溶液Tris·HCl溶液：50 mmol/L，盐酸调节pH值至8.0；EDTA溶液：0.5 mol/L，NaOH调节pH值至8.0；SDS溶液：10％，盐酸调节pH值至7.2；NaOH溶液：2.0 mol/L；NaCl溶液：1.2 mol/L；NaAc溶液：3 mol/L，冰醋酸调节pH值至7.0；TAE缓冲液：50×：2 mol/L Tris碱，0.05 mol/L EDTA，冰醋酸调节pH值至8.0；0.5×：用时将上述储存液稀释100倍；TE溶液：10 mmol/L Tris·HCl，1 mmol/L EDTA，NaOH调节pH值至8.0；STET溶液：8％（w/v）