【名师导学】高考生物一轮复习-2.67 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件 新人教版选修1.pptVIP

* 第六十七课时　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 考点一　筛选菌株、统计菌落数目、设置对照 【基础知识整合】 1．筛选菌株 (1)自然界筛选： 实 例：DNA 多 聚 酶 链 式 反 应 (PCR) 要 求 使 用 酶。科学家从水生耐热细菌Taq中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶。 方法：根据目的菌对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 耐高温的DNA聚合 (2)实验室中筛选： 人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括 、 、____等)，同时 或 其他微生物生长。 (3)选择性培养基 在微生物学中，将允许 种类的微生物生长，同时抑制或阻止 微生物生长的培养基，称作 统计菌落数目 测定微生物数 量 的 常 用 方 法 有 法 和 法。 营养 温度 pH 抑制 阻止 特定 其他种类 选择 稀释涂布平板 显微镜直接计数 3．设置对照 (1)设置对照的主要目的是排除 中 对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。 (2)判断培养基中是否有杂菌污染： 。 (3)判断选择培养基是否具有筛选作用： 。 实验组 非测试因素 将未接种的培养基在相同的条件下进行培养 对照培养基(营养物质齐全)接种后培养观察菌 落数目 【知识拓展】 统计菌落数目 1．显微镜直接记数法 (1)原理：将待测样品制成悬液，然后取一定量的悬液，利用特定细菌计数板或血细胞计数板，放在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。根据在显微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内的微生物总数。 (2)缺点：无法区分死菌与活菌。 2．稀释涂布平板计数法 (1)原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活细菌。 (2)注意：统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，一般选择菌落数在30～300的平板进行记数，计算出平板菌落数的平均值。 (3)计算：按每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M(其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL，M代表稀释倍数)进行计算。 (4)结果分析：统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。因此，统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。可以通过设置重复组，增强实验的说服力与准确性。 【典例精析】 【例1】选择培养是微生物学中最强有力的技术手段之一。主要是指利用不同微生物间生命活动特点的不同，制定环境条件，使仅适应该条件的微生物旺盛生长，从而使其在群落中的数量大大增加，人们能够更容易地从自然界中分离到所需的特定微生物。选择条件可根据所需分离的微生物的特点，从物理、化学、生物及综合多个方面进行选择，如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等许多方面，下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。 (1)本实验所需培养基为 ，碳源为 。 (2)实验原理是: 选择培养基 对羟基苯甲酸 利用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基， 经选择培养，选择出能降解酚类化合物对羟基苯 甲酸的微生物。 (3)①→③重复培养的目的是 。 (4)⑤的菌落中大部分是降解 的微生物。 (5)⑥为 组，⑦为 组，设置⑥的目的是 。 (6)⑤→⑥采用 法，接种到⑥的培养基中，在操作过程中为防止污染应注意的事项是: 【考查类型】本题主要考查选择培养基及对