δ133p53表达状态对rmhtnf效应的影响及机制研究.pdfVIP

中国癌症杂志 2015年第25卷第4期 《 》 CHINA ONCOLOGY 2015 Vol.25 No.4 287 Δ133p53表达状态对rmhTNF 效应的影响及机制研究 1 2 1 1 2 2 姜琪琪 ，张红梅 ，郭爱 ，张娜 ，高志星 ，季万胜 1. 潍坊医学院，山东 潍坊 261053 ； 2. 潍坊医学院附属医院消化内科，山东 潍坊 261031 　　［摘要］　背景与目的：p53异构体在胃癌发生中的作用报道较少。该研究旨在探讨p53异构体Δ133p53在 (recombinant mutant human tumor necrosis factor rmhTNF) 重组改构人肿瘤坏死因子 ， 干预胃癌细胞系生物学效应 / (CCK-8) 中的作用，为胃癌诊断和治疗提供新的依据。方法：采用细胞增殖 毒性检测试剂盒 和流式细胞术，检 测不同浓度的rmhTNF单独或联合氟尿嘧啶(5-FU)应用于MKN-45(表达Δ 133p53)和SGC-7901(不表达Δ 133p53) 细胞，观察细胞抑制率和细胞凋亡情况。通过巢式逆转录多聚酶链反应(nested reverse transcriptase-polymerase chain reaction nRT-PCR) (real-time polymerase chain reaction RT-PCR) ， 和实时荧光定量多聚酶链反应 ， 检测 Δ133p53、Gadd45α和CyclinB1 mRNA的表达变化。结果：rmhTNF单独作用于Δ 133p53表达阳性的MKN-45 细胞有抑制作用，浓度为50、500 IU/mL的rmhTNF作用24 h后，细胞抑制率分别为24.82% 、72.33%(t=-9.558 ， P0.01) ，并可提高5-FU的抑制率，且具有显著的量效和时效关系，5-FU(25 µg/mL)、rmhTNF(50 IU/mL)+5- FU(25 µg/mL) 、rmhTNF(500 IU/mL)+5-FU(25 µg/mL)作用于MKN-45细胞24 h后，抑制率分别为 18.20%、 48.66% 59.83%(F=82.742 P0.01) rmhTNF(50 IU/mL)+5-FU(25 µg/mL) MKN-45 24 48 72 h 、 ， ； 作用于 细胞 、 、 48.66% 68.20% 85.23%(F=128.583 P0.01) 133p53 SGC-7901 后，抑制率分别为 、 、 ， 。而对于Δ 表达阴性的 细 50 500 IU/mL rmhTNF 2.74% 3.25%