低温诱导的植物基因表达与调控.doc

低温诱导的植物基因表达与调控 杭州外国语学校（310023） 周筱娟 摘要 低温是影响植物生长、发育和地理分布的重要因素。近年来，大量研究发现低温诱导许多基因的表达，根据基因表达的蛋白产物，可分为编码功能蛋白基因和调节蛋白基因两大类。本文对这两类低温反应基因的表达与调控及在低温胁迫中作用的最新研究进展进行介绍。 关键词：低温反应基因，低温驯化，基因表达 低温是影响植物生长、发育及其地理分布的重要环境限制因素之一。大多数热带和亚热带植物由于缺乏对低温的适应能力，当环境温度低于10℃时就会受到伤害，严重影响植物的正常生长、发育甚至造成死亡。分布于温带地区的植物，在温暖季节对冰冻的抗性相当弱。但是，随着季节的变化，气温的逐渐降低，植物对冰冻的抗性也逐渐增强。在非冻的低温环境生长一段时间后，植物增强了抗冻能力，从而能耐受随即发生的冰冻温度，这个适应过程称为低温驯化（cold acclimation）。根据植物的种类，达到最大抗冻性的低温驯化时间从数天至数周不等，不同种类植物可以耐受-10℃至-60℃以下的温度（Webb, Uemura Steponkus 1994）。因此，低温驯化是植物提高抗冻性的有效途径。 低温驯化是一个十分复杂的过程。近二十年来，世界各地的科研工作者围绕在低温驯化过程中植物发生的生理生化和分子水平的各种变化进行了大量的研究。最新的研究表明至少有300个低温反应基因参与了低温驯化进程（Fowler Thomashow, 2002）。针对如此复杂的适应过程，低温驯化研究的一个基本目标是分离和鉴定对抗冻性提高起着关键作用的低温反应基因。随着突变分析和分子遗传学方法的大量应用，以拟南芥作为模式植物，已克隆了许多低温反应基因及低温调节的转录因子基因，明确了这些基因的抗冻功能及其涉及的多种低温调控的信号传导途径。根据低温反应基因的蛋白产物可分为两大类：一类是直接保护细胞免受胁迫伤害的功能蛋白；另一类是传递信号和调控基因表达的调节蛋白。 1. 编码功能蛋白的基因 1.1 渗透调节物质 植物的渗透调节物质主要包括脯氨酸、甜菜碱、可溶性糖和醇类物质等。在低温和干旱等环境胁迫时，植物通过诱导渗透调节物质的生物合成酶基因的大量表达，增加这类物质的积累，从而调节离子的平衡稳态，维持渗透压的平衡。 脯氨酸是水溶性很大的氨基酸，具有偶极性，能通过其疏水端与蛋白质联结，亲水端与水分子结合，从而使蛋白通过脯氨酸束缚更多的水分子，因此可增加蛋白质的可溶性，使更多的可溶性蛋白加入到渗透调节的行列中，同时束缚水含量的增加也能避免或减少因细胞脱水引起的蛋白质变性。研究发现水胁迫过程中同时上调二氢吡咯－5－羧酸合成酶基因（P5CS）和下调脯氨酸脱氢酶基因（ProDH）的表达，导致脯氨酸的积累（Yoshiba et al. 1997）。与脯氨酸有关的一个转运体基因（LeProT1）也受水胁迫诱导（Schwacke et al. 1999）。大量实验证明通过转化脯氨酸合成酶基因可增强转基因植物的抗脱水和抗冻性。 甜菜碱是另一类常见的渗透调节物质，其化学性质与脯氨酸相似，也属于小分子量化合物，具有强的溶解度，在生理pH范围内不带净电荷，对植物无毒害作用，其分布局限于细胞溶质内。甜菜碱具有重要的生理功能，一方面是通过与蛋白的相互作用，保护生物大分子在高电解质浓度下不变性；另一方面，作为渗透平衡物维持细胞的膨压。植物受到低温和干旱胁迫时，甜菜碱醛脱氢酶（BADH）活性增强，BADH基因的表达量增加，从而使甜菜碱大量积累。 此外，蔗糖、海藻糖、麦芽糖等可溶性糖和山梨醇、甘露醇等多元醇的冰冻保护作用，主要是通过细胞内的玻璃化状态避免细胞溶液结晶，及保护膜和蛋白质结构。 1.2 活性氧清除剂 大量研究表明低温胁迫诱导植物各种抗氧化酶的积累，如超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、抗坏血酸过氧化物酶（AsA-POD）、谷胱苷肽－硫－转移酶（GST）和谷胱苷肽过氧化酶等清除氧自由剂。由于植物受到胁迫损伤时，体内活性氧自由基大量积累，导致膜脂过氧化加剧及膜蛋白凝集，质膜通透性增加（沈漫等，1997）。因此抗氧化酶活性和含量的增加，可有效加强低温下植物对膜脂过氧化的自身保护，从代谢水平减轻对细胞的损伤。在提高植物抗冻性研究中，导入抗氧化酶基因（SOD）是目前抗冻基因工程中的一条有效途径。 1.3 冰冻保护蛋白 抗冻蛋白（AFPs）最先发现于极地海洋鱼类中，它能非连续地降低体液冰点，并通过吸附于冰晶的特殊表面有效地阻止和改变冰晶的生长。鱼类AFPs是研究最清楚的抗冻蛋白，而有关植物抗冻蛋白的研究相对较少。现已证明，低温驯化的冬黑麦（Griffith et al., 1992）、雪莲和沙冬青（费云标等，1994）等植物中都有内源AFPs的产生。由于AFPs能影响冰晶