病原生物学第4章消毒与灭菌.pptVIP

第四章 消毒与灭菌 学习内容 基本概念 物理消毒灭菌法 化学消毒灭菌法 生物安全 学习要求 1．掌握消毒、灭菌、防腐、无菌、无菌操作的概念。 2．熟悉热力灭菌、紫外线杀菌、滤过除菌等方法的应用范围及注意事项。 3．了解： （1）常用化学消毒剂的种类、作用原理、使用对象和影响因素。 （2）生物危害程度的分级、实验室生物安全防护设施。 消毒灭菌的原理及意义 微生物的生命活动极易受外界环境条件影响，如果环境适宜，可促进微生物的生长繁殖；剧烈的环境变化则可使微生物的生长受到抑制至死亡。 了解外界环境因素对微生物的影响，以便控制外界因素，达到利用或消灭微生物的目的。 基本概念 1、消毒（Disinfection） ：用物理或化学方法杀死物体上病原微生物的方法。 如注射前用2%的碘酒在局部皮肤涂擦；用75%的酒精棉球擦拭体温表等。用于消毒的化学药物称为消毒剂。 2、灭菌（ Sterilization ）：用物理或化学方法清除或杀灭物体上所有微生物（包括病原微生物、非病原微生物、繁殖体和细菌的芽胞）的方法。 如高压蒸汽灭菌法灭菌用于外科手术的手术器械的方法，经灭菌后的物品将达到无菌状态。 基本概念 3、防腐：是指防止或抑制微生物生长繁殖的方法。用于防腐作用的化学药品称防腐剂。用于防腐的化学药品称为防腐剂。如在注射针剂中加入0.01%硫柳汞，防止杂菌生长。 4、抑菌（ Bacteriostasis ）：抑制人体内部或外部细菌生长繁殖的方法。常用的抑菌剂为各种抗生素，可在体内抑制细菌繁殖或在体外用于抑菌试验以检测细菌对抗生素的敏感性。 基本概念 5、无菌（ Asepsis ）：指物体上无活的微生物存在的状态。 6、无菌操作（ Antiseptic technique ）：防止微生物进入机体或物体的操作方法，称无菌操作或无菌技术。如外科手术，细菌接种等。 7、卫生清理：将微生物污染了无生命表面还原为安全水平的处理过程。如病人衣服换洗，用具、房间的卫生处理等。 第一节 物理消毒灭菌法 一、热力消毒灭菌法 二、辐射杀菌法 三、滤过除菌法 四、超声波灭菌法 五、其他物理抑菌或杀菌法 温度对细菌有何影响? 一、热力消毒灭菌法 热力杀菌的原理：高温对微生物有明显的致死作用，其主要是通过变性蛋白、破坏细胞膜和降解核酸达到杀菌作用。一般细菌繁殖体在干燥状态下80℃～100℃经1h可被杀死，芽胞则需160℃～170℃经2h可被杀死。 方法 （1）干热灭菌法 （2）湿热消毒灭菌法 在灭菌温度和时间相同的情况下，以湿热灭菌法效果为佳。 （一）干热灭菌法 干热灭菌法需要更高的温度和较长的时间。灭菌物品主要限于玻璃器皿、油类制剂、粉剂等。有火焰灭菌和热空气灭菌二种。 （1）焚烧：仅用于废弃的污染物品或死于传染病的人或动物尸体的烧毁。在急用情况下，金属器械的灭菌，可放在糖瓷或金属盘中，倒入少许95%酒精，点烧燃烧后可达到的目的。 （2）烧灼：直接用火焰灭菌，耐热的器皿可用烧灼法灭菌，如在微生物实验室中接种环、试管口等可在火焰中直接烧灼灭菌。 （3）干烤：是利用密闭的电热干烤箱加热空气进行灭菌。干烤箱通电后，加热至160～170℃，维持2 ～ 3小时，可杀灭一切微生物包括芽胞。本法仅适用于玻璃器皿、油类制剂、粉剂等的灭菌。 （2）煮沸法： 水温100 ℃经5min能杀死一般细菌的繁殖体。芽胞要煮沸1-2h。 手术器械、注射器、针头及食具等可用此法。 （3）流通蒸气法： 10O ℃ ，蒸15-30min，可杀死细菌的繁殖体，但不能杀死芽胞。 （4）间歇灭菌法：10O ℃ ，蒸15-30min，或75-80℃ 30-60min，每日一次，连续三日，也可达到灭菌的目的。用于不耐高温的培养基的灭菌。 （5）高压蒸气灭菌法 高压蒸汽灭菌法:即用高压蒸汽灭菌器进行灭菌的方法。是应用最广、最有效的灭菌方法。 原理：给高压蒸汽灭菌器加水、放入被灭菌物品、密闭、加热，蒸汽产生压力，随压力的增大水的沸点升高，温度也升至100℃以上，以提高灭菌的效果，缩短灭菌时间。 灭菌条件：常用1.02kg／cm2 （每平方英寸15磅）的压力，在12l.3℃温度下，维持15-20min，即可杀死所有微生物，达到完全灭菌的目的。 应用：常用于如培养基、溶液、器皿、器械、敷料、橡皮手套、工作服和小实验动物尸体等的灭菌。 灭菌注意：须充分排除灭菌器内原有的冷空气。 生产实践中是如何杀灭芽胞的？ 若对肉类原料上的肉毒芽胞梭菌灭菌不彻底，它就会在成品罐头中生长繁殖并产生极毒的肉毒毒素，危害人体健康。已知它的芽孢在121℃下则仅需10min。这就要求食品加工厂在对肉类罐头进行灭菌时，应掌握在121℃下维持20min以上。