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微生物室 作业指导书 文件编号：PYYK-7-2014 第A版 编制： 郭莎莎 审核： 杨到凤 批准： 张楠伟 生效日期：2014年01月01日 濮阳市第二人民医院检验科 目 录 序号 主 题 内 容 代 号 页 号 1 结核分支杆菌药敏和初步菌种鉴定 PYYK-7-2012-01 4 2 涂片找抗酸杆菌操作规程 PYYK-7-2012-02 6 3 普通细菌培养鉴定操作规程 PYYK-7-2012-03 8 4 尿液培养操作规程 PYYK-7-2012-04 10 5 血液培养操作规程 PYYK-7-2012-05 12 6 黑马Bact-ist微生物分析系统操作维护规程 PYYK-7-2012-06 14 7 GNP-9270型隔水式恒温培养箱操作维护规程 PYYK-7-2012-07 18 8 BD960结核分支杆菌培养仪操作维护规程 PYYK-7-2012-08 19 9 BSC-1100ⅡB2型生物安全柜操作维护规程 PYYK-7-2012-09 24 10 飞鸽牌离心机操作维护规程 PYYK-7-2012-10 28  修 订 页 序号 文件编号 页码 需更改的内容 更改内容 批准人 批准日期 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21  结核分支杆菌药敏和初步菌种鉴定 1 检验目的 做疾病的病原学诊断，查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系，指导临床治疗及预后和流行病学的调查。 2 原理 若接种的MGIT培养管中有分支杆菌生长，管中的营养成分和氧气将不断被消耗，MGIT培养管中的荧光显示剂将随着管内氧气浓度的变化而发生反应。一旦培养管内氧气被利用，管内荧光指示剂将在特定光源的激活下释放荧光。BACTEC MGIT960荧光强度记忆探测器将每隔60min连续测定培养管内荧光强度，从而判断管内分支杆菌生长情况。 3 标本要求 （1）标本类型：深部痰液。 （2）标本采集：见标本采集手册 （3）标本储存和运输：室温放置，室温运输并立即送检。 （4）标本拒收状态：非无菌方式采集的标本。 4 容器和添加剂类型 使用灭菌器皿盛放标本，不加任何防腐剂。 5 试剂 （1）试剂名称：Middlebrook7H9培养肉汤，OADC营养添加剂，抑菌剂PANTA。 （2）试剂生产厂家：美国BD生物技术有限公司 （3）包装规格：7X100 （4）试剂盒组成：培养肉汤，营养添加剂，抑菌剂 6仪器设备： BACTEC MGIT960全自动分支杆菌培养仪；美国BD生物技术有限公司。 酒精灯 显微镜、超净工作台、台式离心机 7校准程序 (送XX市计量质量检测研究所校准) 8操作步骤 见仪器操作维护规程：BD960结核分支杆菌培养仪操作维护规程； 9质量控制： 参加我科质量管理小组组织的各项质量控制活动 10 生物参考区间 阴性 11 患者检验结果的可报告区间 阴性/阳性， 药敏及菌种鉴定见BD960结核分支杆菌培养仪操作维护规程； 12 临床意义： 分支杆菌的药敏试验有助于筛选有效的抗结核药物，提示药物所需的治疗剂量，供临床医生和防痨医生参考；同时，还可了解耐药株的流行情况，为抗结核药物的合理应用提供试验依据。  涂片找抗酸杆菌操作规程 （改良碱性复红法） 1 检验目的 检验样本中是否含有抗酸杆菌，为临床提供诊断依据。 2 原理 结核菌、麻疯杆菌、耻垢菌等抗酸性菌，因其菌体表面有一层脂或脂质之皮膜不易着色，但一经着色后酸或乙醇的作用亦是不容易把它脱色。利用这特性并以增强的染色液予染色，然后再以酸及乙醇加以处理，使其脱色后再对比染色，此时抗酸性菌仍是固定着最初色素的颜色（红色）。 3标本要求 （1）标本类型：病人的痰、穿刺关节液、腹水、胸积液、组织、脑脊液、分泌物、尿液等 （2）标本采集：见标本采集手册（一般须得深咳痰，其它无特殊要求。） （3）标本储存和运输：可室温保存、室温运送。病人标本须密