埃博拉病毒抗体间接ELISA检测方法的建立及应用.pdfVIP

畜 牧 黠 阳 学 切 . 报 门 剑 MQ ， 、 们 ， 3 ， ， 、 ι u h r a-v MUJM 6e AC 6t 9a #, A 尚 V z QU 力 4 SLW 叫 w α 刷 E n r--a 札 doi: 10. 11843/j. issn. 0366-6964. 2016. 03. 027 埃博拉病毒抗体间接 ELISA 检测方法的建立及应用 曹增国l ，王化磊1 ， 6 ，盖微微l.2 ，郑学星l ， 6 ，全宏丽1 ， 3 ，李 岭1.2 ，王丽娜l ， 4 ， 冯 娜1.6 ，赵永坤l ， 6 ，王铁成l ， 6 ，高玉伟l ， 6 ，毕玉海5 ，杨松涛lJ\ 夏威柱1，6* (].中国人民解放军军事民学科学院军事兽医研究所，吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室，长春 130122; 2. 吉林大学动物医学学院，长春 130062; 3. 长春西诺生物科技有限公司，长春 130012; 4. 吉林农业大学动物科学技术学院，长春 130118;5. 中国科学院微生物研究所，北京 100101; 6. 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，扬州 225009) 摘 要:为建立 EBOV 抗体间接 ELISA 检测方法，以纯化后的 EBOV 糖蛋白作为包被抗原，HRP 标记山羊抗马 IgG 为二抗，EBOV 阳性马血清和阴性马血清分别为阳、阴性对照，优化反应条件，以 EBOV 病毒样颗粒免疫获得 的高免马血清评价其特异性和敏感性，并将检测结果与基于假病毒的中和抗体检测结果相比较，进一步评价 EB­ OV抗体凹_ISA 检测方法在 EBOV 免疫血清抗体水平检测中的应用。优化后的间接 ELISA 方法可特异性检测 EBOV 抗体，与西尼罗病毒等的阳性血清均不发生反应，检测结果与基于假病毒的中和抗体检测结果相平行。批 内、批间试验变异系数均小子 8% 。本研究成功建立了 EBOV 抗体间接 ELlSA 检测方法，为 EBOV 免疫血清抗体 水平检测提供了一种简便、快速的检测方法。 关键词:埃博拉病毒;糖蛋白(GP) ;间接 ELISA; 抗体检测 中图分类号:S852.659.5 文献标志码:A 文章编号: 0366-6964(2016)03-0615-05 Development of an Indirect ELISA for Detecting Ebola Virus Antibody and Its Application l 16 CAO Zeng-guo , WANG Hua-lei .