定量检测囊性纤维化跨膜传导调节因子BA-ELISA方法的建立与评价.pdfVIP

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2017-09-03 发布于北京
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定量检测囊性纤维化跨膜传导调节因子BA-ELISA方法的建立与评价.pdf

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154 ￡蝤!』垒巫堕理趟!垫!!!!!i12 邱枫1一，曾杰1，一，李坤2，陈爱君2，徐万祥3，倪崖1，2△ (1．温州医科大学检验医学院、生命科学学院，浙江温州325035；2．浙江省医学科学院生殖医学研究中心，杭州310013 3．上海计划生育研究所国家人口和计划生育避孕药物重点实验室，上海200032) 【摘要】并评价其可靠性。方法：优选设计CFIR三个表位的大肠杆菌表达抗原，免疫新西兰白兔获得CFrR多克隆抗体，用纯化后的抗体包被酶标板，并用生物素对其标记，从人精子提取CFIR作为抗原，用辣根过氧化物酶偶联的亲和素检测，优化两种抗体浓度及实验参数，建立可定量检测CFIR蛋白的双抗体夹心BA．ELISA方法；用临床精子标本评估所建立方法的重复性、特异性等。结果：CF／R包被抗体和生物素化CFrR抗体最适浓度分别为4 tc,／nfll和10 为0．15 法，具有特异性强、灵敏度高等特点。【关键词】CFIR蛋白；CFrR多克隆抗体；生物素一亲和素ELISA 【中图分类号1R392—33 【文献标识码】A 【文章编号】1000-6834(2015)02．154-004 【DOl】10．13459／j．cnki．cj印．2015．02．016 Establishmentandevaluationofmethodsfor determinatingcystic fibrosis transmembraneconductance regulatorquantitatively QiU Jiel”，LIKun2，CHEN Yal，2△ Fen91一，ZENG Ai．inn2，XUWan—xian93，NI of ofLife (1．School Science，SchoolSciences，WenzhouMedical 325035；2．Centerof Medical‰ratory University，Wenzhoo Reproductive ofMedical and Medicine，ZhejiangAcademy 310013；3．National Sciences，mnszhoo PopulationFamilyPlanningKey of and InstituteofPlannedParenthood Laboratory ContraceptiveDrugsDevices，Shanghai Research，Shanghai200032，China) establishand evaluateaBA．ELISAmethodforthe detectionofcvstic con— 【ABS