复合多因素法对血瘀型肝纤维化大鼠模型的建立和评价.pdfVIP

世界科学技术一甲医药现代化食探索 复合多因素a去对血疾型肝纤维化大鼠 棋型的建立和评价六 彭 岳，韦燕飞，赵铁建女女，段雪琳，刘雪梅 (广西中医药大学基础医学院南宁 530200 ) 摘 要:目的:本研究在中医学辨证思维指导下，根据血痪证理论探索和改良造模方法，采用多因素复 合法建立血痪型肝纤维化病证结合大鼠模型。方法:通过二甲基亚硝脏、小牛血清白蛋白和去甲肾上腺素 注射液联合注射，外加乙醇灌胃及高脂低蛋白饲料喂养，多因素联合构建血癖型肝纤维化大鼠模型。造模 结束观察大鼠的死亡率，评价中医血痪证证候，进行证候等级评分，观察肝脏病理学大体形态，检测肝功能 改变，采用免疫纽化法观察I 型和 III 型肢原、α- 平滑肌肌动蛋白(α-SMA) 3 种肢原蛋白的表达情况、放射 酶免法血清学检测大鼠肝纤维化4 项一-HA、 P3NP， LN、 C IV 的含量。将以上结果与传统四氯化碳( CCl4 ) 单因素造模法进行比较。结果:血癖证组:①大鼠的死亡率为 20%; ⑧大鼠出现痪斑、舌紫暗、使法等典型的 中医血痪证证候，血痪证证使等级坪分高;③病理学大体形态观察发现肝脏出现表面暗白、密布灰白结节、 质硬脆等纤维样变化;④血清学肝功能检测发现模型大鼠的 ALT 和 AST ，以及 TBIL、 DBIL 及 IBIL 的含量 均显著增加;⑤肝脏 I 型和 III 型肢原、 α-SMA 3 种肢原蛋白的表达水平显著增高;⑥大鼠的血清肝纤维化 4 项一-HA、 P3NP、 LN 、 C IV 的含量均显著增加。与 CCl4 模型组相比，多因素复合法所致血痴证模型组 以上各项结果(除了死亡率及肝功能外)更为明显，结果有统计学差异(P0.05 )0 结论:多因素复合造模方 法能有效地改善 CCl4 造模法的高死亡率缺点;模型动物同时具备了疾病与证候双重特征，既符合中医血痪 证证候的基本特点，又与西医肝纤维化病理特征相一致。 关键词:血痪证肝纤维化动物模型 doi: 1O.11842/wst. 2016.0 1.024 中图分类号:R575 文献标识码:A 目前，现代医学对肝纤维化形成及逆转机制的 目前常用于肝纤维化研究的动物模型，有的造模周期 研究层次走过了从器官到细胞，深入到了细胞因子 太长，有的死亡率太高，有的纤维化形成欠稳定 [2] 。并 及胞内信号转导、基因表达的阶段 [1] 。然而，中西医 且绝大多数此类由单因素作用而建立的动物模型， 结合依然是肝纤维化疾病治疗研究的趋势，此类研 并不能全面、准确地复制出人类肝脏的纤维化病变 究必须要有一个符合要求的动物模型作为研究平 (当然更模拟不出病变状况复杂的中医血痕证)，限 台，才能保证实验过程和结果的准确度和信度。而 制了这些模型的应用性和研究价值I3lo 针对上述情况，笔者以中医学辨证思维作为指 收稿日期:2015-08-03 导，根据血痕证理论，通过造模因素的优化和方法 修回日期:2015-12-19 六 国家自然科学基金地区科学基金项目() :白花丹疏对肝纤维化 HSEC 的干预作用及其机制研究，负责人:赵铁建;国家自然科学基 金地区科学基金项目 :白花丹眼干预肝癌血管新生及其信号调控研究，负责人:韦燕飞;国家自然科学基金青年科学基金项目 : 基于 TLR4 通道的白花丹鼠抗肝纤维化及活血化亦作用机制研究，负责人:彭岳;广西科学研究与技术开发计划基金项目(桂科 攻 :基于 HSEC 的血痪型肝纤维化模型构建与壮药的活血化痪药效件价研究，负责人:赵铁建;广西