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四川省岳池县第一中学高中生物-专题5-课题1-DNA的粗提和鉴定学案-新人教版选修1
DNA的粗提和鉴定
学习目标
1.知道DNA的物理化学性质,尤其是DNA的溶解性。
2.简述二苯胺法鉴定DNA的方法和原理。
3.知道DNA提取与鉴定实验操作过程。
4.关注实验过程的注意事项,学会实验结果分析与评价,培养学生的综合分析问题的能力。
重点与难点
重点: DNA提取与鉴定的原理
难点:实验过程的注意事项、结果的分析与评价
第1课时
课前预习
使用说明与学法指导
1.回顾细胞中DNA存在部位
2.掌握DNA提取和鉴定原理以及提取材料的选择
知识准备
1.DNA存在于细胞的部位
2.蛋白质的相关特性
教材助读
一、DNA的粗提取与鉴定的原理
1.DNA粗提取的原理(结合右下方图形分析)
①、DNA的性质:DNA和蛋白质的溶解性、对酶、高温和洗涤剂的耐受性
在NaCl溶液中的溶解度 对蛋白酶的耐受性 对高温的耐受性 对洗涤剂的耐受性 DNA
蛋白质 比如有些蛋白质可以溶解在稀的氯化钠溶液中,高浓度的盐溶液会使蛋白质从溶液中析出 能被蛋白酶催化水解 易变性
②、DNA粗提取的原理有些哪些?
ⅰ、
ⅱ、
2、DNA鉴定的原理:
二、DNA粗提取的材料选择:
1.适于作实验的材料:DNA含量 ;动物材料比植物材料好;由于哺乳动物红细胞中 ,因此不能作为提取DNA的材料;
2.鸡(红)血适宜作为实验材料的原因:①鸡血(红)细胞核 ;② ;③ 。
▲若用动物肝脏等组织为材料,则需要研磨、匀浆和离心或过滤 ,对设备要求较高,操作烦琐;若以植物组织(如菜花,又称花椰菜)为材料,则需要研磨并加入 、离心或过滤,以破坏细胞膜。
▲实验材料——鸡血细胞液的提取:向新鲜鸡血液中加入抗凝固剂—— ,并搅匀,使血液与柠檬酸钠混合,置于低温下静置1d或离心;结果:血液分层:上层为淡黄色液体,是 ,下层为红色深沉物,是 。
三.知识注解 1、实验原理
①、在NaCl溶液浓度低于0.14 mol/L时,DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低;在0.14 mol/L时,DNA溶解度最小;当NaCl溶液浓度继续增加时,DNA的溶解度又逐渐增大。利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
②、DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以得到较纯的DNA。
2.材料选择
含有DNA的生物材料都可以,但选用DNA含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大
选择鸡血的优点:
鸡是真核生物,DNA都在染色体上。鸟类的血细胞核大,DNA多。不需要破除细胞壁。
注意:哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核所以不选择
鸡血细胞液不能直接用,需要加入柠檬酸钠抗凝。
作用机理:柠檬酸钠能与血浆中的Ca2+发生反应,生成柠檬酸钙络合物,血浆中游离的Ca2+大大减少,血液就不会凝固
3.DNA鉴定
沸水条件下,DNA遇二苯胺变蓝。因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂
预习自测题
1.NaCl的物质量为多少mol/L时,DNA的溶解度最小( )
A.0.12 B.0.13 C.0.14 D.0.15
2.有关“DNA粗提取与鉴定”实验原理的叙述正确的是( )
A.DNA在NaCl溶液中的溶解度,随NaCl溶液浓度的降低而减小
B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA
C.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于所有有机溶剂
D.在沸水中,DNA遇二苯胺会出现紫色反应
我的疑问
学始于疑
什么方法提取DNA,选择什么材料适合提取DNA
课内探究
质疑探究
如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出?
A.防止凝血 B.加快DNA析出 C.加快DNA溶解 D.加速凝血
3、向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中不断加入蒸馏水,在这个过程中DNA的溶解度变化情况分别是( )
A.减小;减小 B.增大;增大 C.先减小后增大 D.增大;减小
欲使溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中的DNA析出,最有效的办法是( )
A.加蒸馏水 B.加矿泉水
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