维生素C的工业分析方法及原理.docVIP

维生素C的工业分析方法及原理 前言： 维生素C（Vitamin C ，Ascorbic Acid）又叫L-抗坏血酸，是一种水溶性维生素。食物中的维生素C被人体小肠上段吸收。一旦吸收，就分布到体内所有的水溶性结构中，正常成人体内的维生素C代谢活性池中约有1500mg维生素C，最高储存峰值为3000mg维生素C。正常情况下，维生素C绝大部分在体内经代谢分解成草酸或与硫酸结合生成抗坏血酸-2-硫酸由尿排出；另一部分可直接由尿排出体外。 2，6一二氯酚靛酚滴定法和电化学法等。这些方法都存在着一定的局限性，如操作过程复杂，所用试剂不稳定，速度慢，背景干扰大以及由果蔬获得的浸提液大多带有颜色而导致滴定终点不明显等缺点。近年来，建立的测定Vc的其他方法还有催化动力学和光度法相结合的方法，及Vc传感器测定方法，固定pH滴定法等。 工业中常用的几种Vc分析方法： （一）间接原子吸收法测定维生素C的含量 原子吸收间接测定Vc含量的方法是基于Vc的强还原性，利用Vc和金属离子反应的定量关系，通过用原子吸收测量金属而间接确定Vc的含量.利用银离子可被vc还原为银沉淀的原理，研究了原子吸收法间接测定Vc的最佳条件。实验样品测定表明．该方法准确、简便、快速、不受样品自身颜色的干扰。 基本原理： Vc分子中有二烯醇基，具强还原性，可被硝酸银氧化为去氢Vc，同时产生黑色银沉淀,沉淀经离心分离，测定沉淀或上清液中的银离子，可间接测得药片和一些植物组织中的Vc含量。 （二）荧光光谱电化学法测定维生素C 荧光分析法具有灵敏度高，线性关系好，精密度好，以及不受杂质干 扰等优点。由于Vc本身几乎没有荧光，所以荧光法的经典做法是将Vc经氧化剂氧化为脱氢Vc后，与邻苯二胺(OPDA)反应生成有荧光的喹喔啉(Quinoxalin，QNL)，其荧光强度与脱氢Vc的浓度在一定条件下成正比，以此测定样品中的Vc。已报道的文献中，常用的氧化剂有活性炭和2，6．二氯靛酚钠等。 基本原理： Vc和其氧化后的产物脱氢Vc几乎没有荧光，但脱氢Vc与OPDA缩合后生成的荧光产物QNL在310 am光的激发下，能发射波长为430 am的特征荧光峰. (三) 磷钼蓝分光光度法测定维生素C 磷钼蓝法是一种常用来测定微量磷含量的分光光度方法，利用礴钼酸铵的氧化性测定食品、药物中维生索c的方法尚未见报道。现提出一种方便、快速地测定维生素c的分光光度法：利用磷钼酸铵定量地与维生紊c反应，生成磷钼蓝来测定其含量。该方法用过量的磷钼酸铵测定微量的还原荆维生素c，不会生成钼蓝，测试条件允许范围较宽．抗干扰能力强，无须对样品进行特别处理，分析结果的准确度高，重复性好。应用此方法分析生物、药物等试样中微量维生紊c的含量，结果令人满意。 基本原理： 磷酸盐与钼酸铵在酸性溶液中反应生成黄色的磷钼酸铵。 磷钼酸铵有很强的氧化活性，能将还原型维生素c氧化成L-脱氢抗坏血酸，而磷钼酸铵本身被还原成磷钼蓝。 （四）水果中维生素1含量的测定及比较 维生素C广泛存在于新鲜水果中，它具有保持肌肤润滑、防止衰老、抗坏血酸等作用，是人体必需的主要维生素之一。VC在水果中主要以还原型（ASA）存在。维生素C又名抗坏血酸，能溶于水、乙醇和甲醇，而不溶于其他不同有机溶剂，具有酸味和还原性，有.种异构体，即L-抗坏血酸，D-抗坏血酸，L-异抗坏血酸，D-异抗坏血酸。天然抗坏血酸主要以L- 抗坏血酸为主，其效力最高，也是通常所指的抗坏血酸。抗坏血酸在合适的条件下，可氧化成脱氢抗坏血酸，脱氢后的L-脱氢抗坏血酸在生物体内可还原为L-抗坏血酸，且这种变化是可逆的，故仍有生物活性。脱氢抗坏血酸可进一步被氧化，生成二酮古洛糖酸，而这一过程是不可逆的。在许多水果和蔬菜中，维生素C主要以还原型抗坏血酸存在。维生素C的固体较稳定，水溶液最容易受氧化，所以测定VC的准确性很大程度上取决于分析技术。为此，选取.种水果对其维生素C的含量进行了测定和比较。 （五）饮料中还原型维生素C 与总维生素C测定方法的研究 目前食品中还原型抗坏血酸VC 与总VC的测定主要有比色法荧光法也有人采用高效液相色谱(HPLC)-紫外检测器法测定食品中的还原型VC[2] 本研究建立了前处理与流动相更为简单的HPLC 法利用二硫苏糖醇dithiothreitolDTT 可以选择性地将脱氢全部还原为抗坏血酸而二酮古洛糖酸则不会被还原，然后用HPLC 法测定样品不经DTT 还原直接测定还原型VC 经DTT 还原测定总VC 两种测定仅前处理不同色谱条件相同简便易行。 （六）胶束增敏法测定果蔬中VC的含量 利用VC分子中的烯二醇基将Fe(Ⅲ)定量还原为Fe(II)，Fe2+与邻二氮菲反应形成橙红色络合物，环糊精对该络合物有增敏作用，据此建立胶束增敏法间接测定VC的新方法，用于果蔬中VC含量的测定