常规RT-PCR与荧光定量RT-PCR检测GⅠ、GⅡ型诺如病毒方法的建立及其应用.pdfVIP

中国人兽共患病学报 602 31 Chinese ofZoonoses 2015， (7) Journal DOI：10．3969／cjz．j．issn．1002—2694，2015．07．002 I、 常规RT—PCR与荧光定量RT—PCR检测G GⅡ型诺如病毒方法的建立及其应用 钱明明1，许海燕2，宗 睛1，阴甜甜1，杨文彬1，宋召军1，黄金林1，焦新安1 摘 要：目的 优化筛选出最佳PCR反应体系与反应条件，并从灵敏性、特异性、临床样品检测等方面对建立的方法进行比较与评价。结 果 该两种方法特异性强，与札幌病毒、轮状病毒、星状病毒、腺病毒同时检测无交叉反应，同一体系内GI、GII型诺如病毒相 互之间没有干扰；常规RT_PCR最低检测限为103 copies／pL，荧光定量RT—PCR最低检测限为102copies／弘L；对180份临床粪 180)，符合率达100％；对15份阳性样品测序分析，证实均为诺如病毒。结论 可用于诺如病毒的快速检测，荧光定量RT_PCR更为灵敏。 关键词：常规RT-PCR；荧光定量RT—PCR；GI、GII型诺如病毒 中图分类号：R450 文献标识码：A 文章编号：1002—2694(2015)07一0602—05 EstablishmentofconventionalRT-PCRandrea卜timeR7r-PCR tOdetectnor0Virusandits application QIAN Tian-tianl， Ming—min91，XUHai—yan2，ZONGQin91，YIN YANGWen-binl，SONG Xin—anl Zhao—junl，HUANGJin—linl，JIA0 (1．K已j，Ln60r口￡oryo，Zoo加s已5，阮起gz^o“‰i伽rmy，％竹g拍o“225009，吼i挖口； DisP口s8Co竹￡rDZnnd 226000，C^i珂口) 2．N口柙fo竹gCP挖￡已r／br Pr8P孢￡io起，NⅡ竹fo竹g establishedconventionalRT—PCRandreal—timeRT—PCRmethodsforthedetectionofnorovirusGIand Abstract：We GII． ThePCR andreactionconditionswere sothatconventionalRT-PCRandreal—timeRT_PCRmethodwerees— system optimized tablished，the andthedetectionofclinicalstool ofthesetwomethodswere andeval— sensitivity，specificity specimens compared uated．