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c-Met 小分子酪氨酸激酶抑制剂ARQ197 对肺腺癌细胞放射增敏作用及其机制的实验研究 中文摘要 c-Met 小分子酪氨酸激酶抑制剂ARQ197 对肺腺癌细胞放 射增敏作用及其机制的实验研究 中文摘要 目的：研究和探讨c-Met 小分子酪氨酸激酶抑制剂ARQ197 是否对肺腺癌细胞有 放射增敏作用，若具有放射增敏作用则进一步探讨其放射增敏的可能机制，为 ARQ197 作为增敏剂应用于肺癌放射治疗提供实验依据。 方法：采用人肺腺癌细胞系A549 、H1299 体外培养作为研究对象。首先用不同 系列浓度的重组人肝细胞生长因子（HGF ）和ARQ197 分别处理肺腺癌细胞，应用克 隆形成试验检测细胞增殖情况，筛选出用于放射敏感性研究的HGF 和ARQ197 的合 适浓度。随后将肺腺癌细胞分为以下四组：对照组、HGF 处理组、ARQ197 处理组、 HGF 和ARQ197 共同处理组，应用细胞克隆形成试验，绘制放射后细胞存活曲线， 观察不同组别之间放射敏感性的差异。而后用 HGF 单独或联合应用不同浓度的 ARQ197 分别处理肺腺癌细胞，应用蛋白印记检测 HGF 单独或联合应用不同浓度 ARQ197 对细胞c-Met 及下游Akt 和Erk1/2 蛋白表达和活化的影响。最后将肺腺癌 细胞分为：对照组、ARQ197 处理组，观察两组接受2Gy 照射前和照射后6h、9h c-Met 及下游Akt 和Erk1/2 蛋白表达和活化水平的变化。 结果：肺腺癌细胞的克隆形成率随着 HGF 浓度的增加呈进行性升高，而随着 ARQ197 浓度的增加则进行性下降。放射后细胞存活曲线示对照组、HGF 处理组、 HGF 和ARQ197 共同处理组及ARQ197 处理组的SF2 值，A549 细胞分别为48.28 ± 2.16% 、82 ±2.62% 、41.53 ±1.71%和38.91 ±1.71%， H1299 细胞分别为58.41. ±3.47%、 85.23 ±6.07%、44.80 ±3.47%和 43.30 ±2.96% 。HGF 、HGF 和 ARQ197 共同处理及 ARQ197 对A549 肺腺癌细胞的放射增益比分别为0.79、1.11、1.19，对H1299 肺腺 癌细胞的放射增益比分别为0.85、1.20、1.27。 H1299 细胞在HGF 刺激后，p-cMet 、p-Akt 、p-Erk1/2 高表达，同时应用ARQ197 ， I 中文摘要 c-Met 小分子酪氨酸激酶抑制剂ARQ197 对肺腺癌细胞放射增敏作用及其机制的实验研究 随着ARQ197 浓度的增加，p-cMet 、p-Akt 、p-Erk1/2 蛋白的表达进行性下降。细胞 接受2Gy 照射后，p-cMet 、p-Akt 、p-Erk1/2 高表达；同时应用ARQ197 ，p-cMet 、p-Akt 、 p-Erk1/2 蛋白的表达显著下降，总的c-Met、Akt 和Erk1/2 蛋白的表达水平无明显变化。 结论：通过平板克隆形成分析法，我们可以得出 ARQ197 对人肺腺癌细胞有一 定的放射增敏作用。通过蛋白印记检测，我们进一步得出 ARQ197 通过抑制 HGF/c-Met 及其下游传导通路的活化对离体肺腺癌细胞株有显著的放射增敏作用。通 过此实验，为ARQ197 作为放射增敏剂运用于肺腺癌的联合治疗提供实验依据。 关键词：肺腺癌; 放射敏感性；c-Met ；ARQ197 作 者：单 芳