CCNG2在人甲状腺乳头状癌K1细胞中的表达和其对K1细胞增殖凋亡影响的研究.pdfVIP

目 录 中文摘要…………………………………………………………：…………l 英文摘要……………………………………………………………………3 英文缩写……………………………………………………………………．．．5 增殖凋亡影响的研究 前言…………………………………………………………………………………………6日U舌………………………………………………………………………………………… 材料与方法………………………………………………………………．7 结果…………………………………………………………………．．17 附图…………………………………………………………………．：………………．．20 讨论………………………………………………………………………………………．．29 结论………………………．：…………………………………………32 参考文献………………………………………………………………34 综述CCNG2及其对肿瘤影响的研究进展………………………………38 致谢………………………………………………………………………．．45 个人简历…………………………………………………………………．46 万方数据 中文摘要 CCNG2在人甲状腺乳头状癌K1细胞中的表达及其对 K1细胞增殖凋亡影响的研究 摘 要 中发现较晚的一员。近年来对其的研究发现，CCNG2具有抑制细胞增殖、 促进凋亡，负性调控肿瘤细胞增殖的作用。本研究旨在探讨CCNG2基因 在甲状腺乳头状癌K1细胞中的表达情况及其对K1细胞增殖、凋亡的影 响，并期望通过实验了解CCNG2基因在上述过程中可能的作用机制，为 以CCNG2为靶点的甲状腺乳头状癌治疗提供实验依据。 方法： 转染体外甲状腺乳头状癌Kl细胞，Westernblot法检测转染结果。 2MTT、流式细胞术分别检测空白对照组、阴性对照组、实验组K1 细胞增殖、凋亡情况。Westernblot法、免疫细胞化学染色法检测CCNG2、 p53、mdm2蛋白表达情况。 3上述实验均重复3次或以上，结果以均数±标准差(x±S)表示。计 量资料行正态性检验及方差齐性检验后采用方差分析，多组数据两两比较 1 采用LSD．t检验。所有实验数据均用SPSS7．0统计学软件进行统计学处 理，P0．05为差异有统计学意义。 结果： l转染条件的优化及检测：不同比例DNA与转染试剂 不同细胞融合度时接受转染，转染效率有差异，以细胞融合度达50～60％ 时转染效率最佳，为(90．33±t．53)％(PO．05)。 2 检测，与对照组比较实验组各时间点均出现生长抑制，并于转染72小时 抑制效应最明显达35．40％(氏0．05)，空白对照组与阴性对照组间差异无 统计学意义(胗0．05)。 万方数据 中文摘要 3FCM检测细胞凋亡结果：转染48小时后，实验组较空白对照组、 0．09)％]衅O．05)；实验组较空白对照组、阴性对照组晚期凋亡率显著升高 阴性对照组比较，细胞早期、晚期凋亡率差异均无统计学意义(PO．05)。 4Western VSO．36±0．032、 表达量较空白对照组、阴性对照组显著升高(0．72±0．053 转染48小时后，实验组与对照组相比，p53、mdm2蛋白表达水平明显上 分别转染pEGFP-N1．CCNG2 p53、mdm2蛋白表达水平上调且与CCNG2表达趋势具有一致性。 48h后实验组 5免疫细胞化学染色法结果：转染pEGFP-N1．CCNG2 CCNG2、p53、mdm2蛋白表达阳性水平明显高于对照组。