EPCs及肝硬化门脉高压症的相关性研究及其治疗探索.pdfVIP

目 录 1 EPCs 与肝硬化门脉高压症的相关性研究及其治疗探索………1 1.1 中文摘要…………………………………………………………1 1.2 英文摘要…………………………………………………………4 1.3 前言………………………………………………………………8 1.4 材料与方法……………………………………………………12 1.5 结果……………………………………………………………23 1.6 讨论……………………………………………………………37 1.7 结论……………………………………………………………43 1.8 参考文献………………………………………………………44 1.9 英汉缩略词对照表……………………………………………47 2 致谢……………………………………………………………48 3 EPCs 与肝硬化门脉高压症的关系及其治疗展望（综述）…49 4 附：在读期间发表文章 EPCs 与肝硬化门脉高压症的相关性研究及其治疗探索 摘 要 目的: 比较正常大鼠、肝硬化 （Liver Cirrhosis,LC ）代偿期大鼠、肝 硬化门脉高压症(Portal Hypertension,PTH) 大鼠骨髓中 EPCs （Endothelial Progenitor Cells, 内皮祖细胞）的数量及增殖、迁移、粘 附功能的变化，揭示EPCs 与肝硬化门脉高压症的关系；探讨培哚普 利（血管紧张素转换酶抑制剂即ACEI 类药物）对肝硬化门脉高压症 的作用和对EPCs 数量及增殖、迁移、粘附功能的影响。方法：纯系 SD 雄性大鼠100 只，体重180~210g，随机分成五组：正常对照组（1 组）、肝硬化代偿期组（2 组）、肝硬化门脉高压症组（3 组）、ACEI 干预组（4 组）、ACEI 干预对照组（5 组），每组20 只。2~5 组采用 0.3ml/100g 体重的浓度梯度（40% 2 组2 周、3~5 组4 周，50%2 组3 周、3~5 组4 周，60% 2 组3 周、3~5 组4 周）四氯化碳菜籽油溶液 双下肢皮下注射并以浓度梯度（50%2 组2 周、3~5 组4 周，10% 2 组3 周、3~5 组4 周，20% 2 组3 周、3~5 组4 周）乙醇溶液和高脂 饮食喂养的综合方法复制大鼠肝硬化和肝硬化门脉高压症模型，1 组 则注射中性菜籽油溶液，饲喂清水、普通饲料做对照。测量1~3 组大 鼠的门静脉压力（Portal Pressure，PP ），全自动生化分析仪测定 1~3 组大鼠血清 ALT （Alanine Aminotransferases, 谷丙转氨酶）、 AST(Aspartate Aminotransferase,谷草转氨酶) 、TBIL （Total Bilirubin, 总胆红素）、ALB （Albumin ，白蛋白）、GLO （Globulin，球蛋白）， 肉眼和光镜下观察测过PP 的大鼠肝脏形态变化，判断造模是否成功。 2 4 组大鼠予以培哚普利 10mg ／kg ／d 灌胃 14d，5 组仅给予等量生理 盐水。同时，用针管冲出1~3 组大鼠四肢长骨骨髓。用密度梯度离心 法由骨髓获得单个核细胞层，培养、分化，荧光显微镜鉴定DiI 标记 乙酰化低密度脂蛋白（DiI-ac-LDL ）和 FITC 标记的荆豆凝集素 I （FITC-UEA-I ）双阳性细胞为 EPCs ，用流式细胞仪计数 EPCs ，用 MTT 法测EPCs 增殖能力，用改良的Boyden 小室法测EPCs 迁移功 能，计数贴壁细胞观察EPCs 粘附能力。4 、5 组完成药物干预后同法 测PP 、鉴定、检测。用SPSS16.0 方差分析所有结果，用t 检验比较 组间均数，用直线相关分析相关性。结果：1.肝功能指标：（1）ALT 、 AST 、TBIL 、GLO ：肝硬化代偿期组（2 组）、肝硬化门脉高压症组 （3 组）分别高于正常对照组（1 组）（P ＜0.05 ）