FcγRⅢa的基因多态性、血清中抗体和补体对利妥昔单抗介导的NK细胞对Raji细胞杀伤作用的影响.pdfVIP

中山大学 FcyRIIla的基因多态性、血清中抗体及补体对利妥昔单抗介导的NK细胞对R面细胞杀伤作用的影响 FcYRIIIa的基因多态性、血清中抗体及补体对利妥昔 单抗介导的NK细胞对Raji细胞杀伤作用的影响 专 业：儿科学。 硕士研究生：屈钰华 导 师：黎 阳副教授 中文摘要 肿瘤是临床常见的疾病，采用常规化疗常难以治愈，而增加化疗强度虽能缩小 肿块，提高缓解率，却无益于延长患者生存期。对大部分肿瘤来说，即使高剂量化 疗配合手术或造血干细胞移植，也很难进一步提高其疗效。要扭转这种局面需寻找 一种高效、低毒的新型抗肿瘤制剂。肿瘤特异性单克隆抗体(monoclonal antibody，MAb，简称单抗)是应用杂交瘤技术针对肿瘤细胞表面的肿瘤相关抗原 或特定的受体而制备出的MAb，可特异性识别肿瘤细胞抗原，选择性地摧毁肿瘤 细胞而健康细胞基本不受影响，为肿瘤患者的靶向免疫治疗带来了希望。针对特定 肿瘤抗原的MAb杀伤肿瘤靶细胞的机理主要有三个方面：①抗体依赖细胞介导的 cell-mediated 细胞毒性(antibody-dependent cell dependent 过补体依赖的细胞毒性(complement 靶细胞结合促进肿瘤细胞凋亡。 ADCC被证明是MAb临床治疗肿瘤的重要机制和手段。MAb首先通过抗原结 合部位与靶细胞(肿瘤细胞)结合，再由效应细胞上的FcyRIIIa识别其Fc段，介 中山大学 RYR皿h的基因多态性、血清中抗体及补体对利妥昔单抗介导的№细胞对R李细胞杀伤作用的影响 好。 正常生理情况下血清中抗体水平由于可竞争性与杀伤效应细胞上的FeyR结合 而降低MAb介导的ADCC抗肿瘤疗效；有研究表明血清中的kG可竞争性抑制曲 妥珠单抗的ADCC效应，该抑制作用可通过增加曲妥珠单抗的剂量而逆转；这种 竞争抑制作用可能是临床上通过ADCC机制治疗肿瘤需大量的MAb的重要原因。 对于有补体缺陷的难治性慢性淋巴细胞性白血病的病人，有临床实验证明，在 于利妥昔单抗治疗时，通过同步输新鲜冰冻血浆的方式来增强的补体作用，可达到 更好的治疗效果。这可能与增加补体的CDC作用有关，通过血浆补体增加肿瘤特 异性MAb的CDC效应，从而达到更好的对肿瘤细胞杀伤作用。 由于临床使用的肿瘤特异性MAbtIE常昂贵，其介导的ADCC抗肿瘤治疗的病人 在治疗期间由于化疗所致的骨髓抑制、合并感染等原因，往往需静脉注射免疫球蛋 白(ⅣIG)及血浆，上述治疗所提供的血清抗体和补体对ADCC抗肿瘤效应的影响 尚不十分清楚，深入研究在肿瘤特异性MAb治疗应用过程中WIG和血浆的配合应 用十分重要。 的基因多态性的分布，了解血液肿瘤患儿对MAb可能的疗效反应；通过体外实验 用利妥昔单抗介导不同FcFRm堪因型的NK细胞对高表达CD20的B细胞淋巴瘤细 差异；并通过增加补体及血清抗体的方式体外检测它们对利妥昔单抗介导ADCC抗 肿瘤作用影响。通过本研究我们希望对使用抗肿瘤特异性MAb的患者合理有效的 应用WIG和血浆提供指导意见及实验依据；这对提高肿瘤特异性MAb的临床疗效 和改善肿瘤患者的生存率具重大意义。 II 中山大学 №yR皿b的基因多态性、血清中抗体及补体对署q妥昔单抗介导的NK细胞对R面细胞杀伤作用的影响 第一部分正常儿童及血液肿瘤患)L中VcTRIIIa基因多态性分布 目的：检测健康儿童及血液肿瘤患)LqbFeyRIIIa的基因多态性的分布，了解血液肿 瘤患儿对MAb可能的疗效反应。 方法： 1．按照DNA{是取试剂盒从收集的外周血标本中提取基因组DNA。 (1)外侧PCR：外侧正义引物A为5’ 2．巢式PCR(ncst-PCR)扩增FcTRIIIa基因： TGGCAAAGGCAGGAAGTATT TGTAAG