GBE对SD大鼠原代肝星状细胞增殖、凋亡和胶原合成的影响.pdfVIP

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GBE对SD大鼠原代肝星状细胞增殖、凋亡和胶原合成的影响

一㈣㈣㈣㈣㈣帆 Y1 肝星状细胞增殖、凋亡及胶原合成的影响 研究生:国 丽 专 业:内科学 导 师:张汝建 副教授 中文摘要 Stellate Cell,HSC)体外培养中, 探讨SD大鼠原代肝星状细胞(Hepatic 不同浓度的银杏叶提取物对其增殖、凋亡及胶原合成的影响 方法 1.采用改良的胶原酶消化法原位分离SD大鼠HSC。 2.O.4%台盘蓝染色计算产量及存活率、显微镜下观察细胞形态、结蛋白 免疫细胞化学染色鉴定分离的HSC。 0、1 3.实验分组:正常对照组、GBE各浓度处理组(0、1、1 00、5001.tg/m1), V 分别用MTT法观察GBE对HSC的增殖影响、ANNEXINFITC/PI双染、流式 细胞仪技术检测HSC凋亡情况、ELISA方法检测细胞的胶原合成。 结果 %。 2.GBE各浓度处理组:1 处理浓度增加,对HSC增殖抑制程度增加,有统计学差异(尸0.05)。 增加(PO.01)。 4.ELISA方法检测细胞的胶原合成显示,随GBE浓度的增加,Ⅳ型胶原 合成的含量逐渐降低,与对照组之间存在明显差异(尸O.05),透明质酸 (Hyaluronic 并成剂量依赖性。 结论 1.采用原位压力灌流及循环灌流能成功实现大鼠肝星状细胞的分离及培 养,原代分离的大鼠HSC经培养活化后可以用于肝纤维化的研究。 I 殖和促进其凋亡,明显下调 化并逆转纤维化的作用。 循环灌流 细胞外基质 2 1·TheratHSCsweredetached an through improved methods. 2.The andsurvival producingcapacity rateofHSC be 0.4% maygained by Blue were Trypan observed staining,cellularmorphology through microscope and cellswereidentifiedasHSC stain. byimmunocytochemical

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