miRNA-16在类风湿性关节炎患者血浆及关节滑液中的表达及临床意义.pdfVIP

中文摘要 miRNA．16在类风湿性关节炎患者血浆和关节滑液中的表 达及临床意义 摘 要 目的：类风湿性关节炎(rheumatoid 慢性炎症病变为显著特征的自身免疫性疾病，发病率及致残率高，严重危 害人类健康。尽管当前X射线、类风湿因子及抗环瓜氨酸肽抗体等血清 学标志物的检测在RA的临床诊断中有着广泛的应用，但多数患者确诊时 全身多个关节已经出现进行性破坏，因而错失了最佳治疗时机，所以人们 是一类非编码小分子RNA，长度仅为21．25nt，广泛存在于真核生物体内， 翻译，主要在转录后水平发挥强大的基因调控功能。现已有大量研究发现 失调在RA的发病过程中扮演着十分重要的角色，而外周血单个核细胞中 更高的特异性和敏感性，此外miR．16的异常表达还与疾病活动度呈显著 相关，以上证据均提示miR一16有望成为RA早期诊断的新一代分子标志 物，并且也可作为监测病情发展的有效指标。目前关于miRNA与RA的 研究大多使用滑膜组织及细胞作为研究对象，而国内尚未见有关RA患者 清或血浆等体液miRNA易于方便取材，并可随时进行检测，具有更好的 临床应用前景。本实验则首次通过检测miR．16在RA患者血浆和关节滑 液中的表达，进而探讨其在RA早期筛选、鉴别诊断以及病情评估中的应．． 用价值。 方法：血浆以及外周血单个核细胞分别来源于30例RA患者和20例 正常健康人，关节滑液则来源于16例上述RA患者及10例骨关节患者 Green I染料法分别检测miR．16在血浆、关节滑液以及 RT-qPCR)，SYBR 外周血单个核细胞中的表达水平，以U6snRNA作为内参。实验数据输入 中文摘要 U检验用于分析并比较 spssl8．0软件包中进行统计学分析，Mann—Whitney 的表达水平与临床各指标的相关性采用Spearman等级相关分析，以 P0．05为差异具有统计学意义。 结果： 出现非特异性产物及引物二聚体现象。 2miR-16在RA患者血浆、关节滑液以及外周血单个核细胞中的表达 miR-16在血浆中的表达水平显著高于关节滑液以及外周血单个核细 中的表达水平高于外周血单个核细胞，上调变化倍数为1．5倍，但无统计 学意义(尸O．05)。 3miR．16在RA患者及正常健康人血浆、外周血单个核细胞中的表达 miR-16在RA患者血浆中的表达水平低于正常健康人，下调变化倍 个核细胞中的表达水平显著高于正常健康人(氏O．01)，上调变化倍数为 1．9倍。 4miR-16在RA及OA患者关节滑液中的表达 与OA患者相比，miR．16在RA患者关节滑液中的表达水平显著升 高(氏O．01)，上调变化倍数为6．25倍。 5miR-16的表达与RA临床相关指标的关系 Disease ActivityScore)呈负 血浆miR-16的表达与DAS28评分(28-joint sedimentation rate，ESR)及C反应蛋白(C．reactive 关(PO．05)； 结论： 1 RA患者血浆和关节滑液miR．16的来源不相同，彼此之间没有相关性， 在血浆和关节滑液中有可能存在不同的miRNA表达谱。 中文摘要 2RA患者关节滑液miR．16的过度表达可能与局部炎症刺激有很大关系。 及深入探索RA的发病机制提供了新的思路。 3血浆miR一16的表达水平有望成为评价RA病情活动度的有效指标。 关键词：关节炎，类风湿；微小RNA；miR．16；血浆；关节滑液；茎 环逆转录引物实时荧光定量PCR 英文摘要 ‘