PCR-SBT法探究河北汉族人群HLA-B15等位基因多态性.pdfVIP

目 录 中文摘要………………………………………………………………………一1 英文摘要………………………………………………………………………一4 研究论文PCR．SBT法研究河北汉族人群甩A—B+15等位基因多态性 前言…………………………………………：………………………………………………．1／月U吾………………………………………………………………………………………………………………………一 材料与方法………………………………………………………………·8 结果…………………………………………………………………………………………12 5 附图……………………………………………………………………………1 附表…………………………………………………………………………………………19 讨论…………………………………………………………………………………………23 结论…………………………………………………………………………………………27 参考文献…………………………………………………………………27 1 综述HLA分型技术进展…………………………………………………3 致谢………………………………………………………………………………………………．42 个人简历………………………………………………………………………43 ’ 中文摘要 摘 要 目的：人类白细胞抗原(humanleukocyte 命活动的各个水平与多个方面，是调控人类特异性免疫应答和决定疾病易 感性个体差异的主要基因系统。如LA系统是迄今为止人类基因组中多态性 程度最高的遗传系统。 札A．B’15组等位基因是m．，A系统中多态性程度最高的基因家族系 统，所编码的分子具有多种不同的血清学特异性。传统的血清学分型方法 等位基因进行高分辨率(，．c后4位数)的分型分析，并且具有准确识别新基因 的能力，是目前如LA基因分型方法中最准确、最可靠和最彻底的方法。 对于器官移植，特别是造血干细胞移植而言，供受者间}玎．一A匹配情况 直接影响移植效果。通过临床回顾性分析研究也证实肌A不同位点的高分 辨错配与移植物排斥、急·[生GVHD的发生等相关。因此在实际临床工作中， 采用高分辨率的分型方法对供受者进行}玎-一A基因分型，无疑会为患者获得 良好的移植效果提供更加可靠的保证。 大量群体遗传学研究表明，HLA等位基因的分布具有明显的种族和地 域的差异。目前，国内有关中国人群儿A系统的高分辨水平基因多态性 研究报道甚少，并且没有关于河北汉族人群的较大样本量精确的高分辨基 因分型数据资料。 本研究的目的在于应用PCR-SBT方法，研究中国造血干细胞捐献者资 水平的多态性及分布特征，初步探讨河北汉族人群甩A．B’15组等位基因 高分辨水平的基因频率及优势基因构成特征，从而为患者寻找最适供者， 改善移植存活率提供参考资料，同时也为本地区人类学及群体遗传学等方 面的研究提供参考资料。 方法： 中文摘要 5 汉族健康无血缘关系志愿者5688名，其中所有中／低分辨分型甩A．B’1 阳性样本1 采用PCR反应扩增肌A．B基因1．8号外显子，对PCR产物纯化后分别用2、 3、4外显子引物进行双向测序。 Analysis软件处理原始数据，生成序列文 3数据处理：使用Sequence 件，用ATF分型软件处理序列文件。 ambiguity 4不确定结果处理：采用杂合性歧义引物分离法(Heterozygo