Septin2对大鼠肾小球系膜细胞增殖的作用.pdfVIP

llI凶医科人学硕一l：学位论文 Sep缅2对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响 中文摘要 目的：探讨S印tin2基因表达变化对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响。 方法：培养原代大鼠肾小球系膜细胞，进行以下实验：1)将绿色荧光蛋白表达质粒 pEGFP．Cl用电穿孔转染的方法导入细胞，24h后荧光显微镜下观察绿色荧光蛋自表达情 况。2)质粒电穿孔转染：细胞分组：①p砌为空质粒转染组，②p砌a．Se叫112质粒转染 b10t检测两组 ①无关对照转染组(sicon)：②sise嘶112转染组。收集细胞蛋白，Westem 细胞S印tiIl2蛋白质表达水平，流式细胞仪分析siS印till2对细胞周期进程的影响。 同时细胞周期调节蛋白cyclill 测结果显示两组细胞Go／Gl期及S期细胞百分比无明显差异。 结论：S印t破过表达可使大鼠肾小球系膜细胞由吲Gl期向S期转化的百分比减少，细 胞周期正调控蛋白表达减少而负调控蛋白表达增多，提示可能通过调节细胞周期蛋白的表 达来抑制系膜细胞增殖，影响细胞周期，有望为系膜增生性肾炎提供新的治疗靶点。 关键词：转染；电穿孔；系膜细胞增殖；细胞周期 …四医科．大学硕●：学位论文 Abstract Ubj优蜢代： T0reSe砌meinVi仃oe任跚s on Prolif训0ninRats． Mes删al ofS印tiIl2 Memods： tlle向llowing 1)11le Cllltured咖a巧ratInes锄西alcclls，processingexp甜ment： 1、)l她chcould nuorescent eXpr鹪s pl姗idspEGFP-C the莎eell int0Ⅱle吲ls．1ktr弛sf．e砸0n wefedet锄ined nuorescent ef!ficiellcy byobseⅣing硼der 24hours of microscope gubsequently．2)Tralls岛ctionS印tiIl2plasIIlidSbyele咖por撕0n： group。1kpl锄idsp砌岱 Groupsdi访ding：①p砌◇衄塔fectiongroup；②pRK5一se曲n2 and wefe仃aIls蠡鳅edint0Ⅱ1e cdlund贸Ⅱle p砌西一S撕112 m船趾gial conditio璐．1he we他ex锄lillcd West锄blot，cdlcycle expr船si∞ofSeptin2protcin by now cell profil鹤we他det锄inedby c舛跚∽tricanalySis，也eaq)ressio鸺ofcycleregulat0巧 ex觚liIled syIltllesis prol