SHH-N信号通路和其靶基因N-myc对神经干细胞增殖的影响.pdfVIP

SHH-N信号通路及其靶基因N—myc对神经干细胞增殖的影响 硕士生姓名： 刘东升 指导教师： 张波教授 专业名称： 外科学 摘要 SHH在细胞和组织中对细胞增殖和细胞周期有着广泛的影响ll】。在神经发育 中，SHH调节神经管【2】的图式发育及神经祖细胞的增值和分化[3-6]。神经干细胞是 位于侧脑室室下区和海马齿状回颗粒下区具有可再生和多向分化能力的祖细胞， 可分化成神经系统中的三系细胞：神经元，星型胶质细胞，少突胶质细剧7-9]．。最 近研究发现在端脑中SHH对维持神经祖细胞内环境与神经修复有重要作用【1．1¨21， 外源性SHI-I可引起神经干细胞的增值【l弘15】。尽管各种细胞分裂素，神经营养因子及 其他分子可调节神经干细胞的增殖，但是调节神经干细胞增殖机制未被详细阐明。 目前SHH导致的细胞增殖和瘤变的机制并不清楚【l¨。在大部分细胞中，SHH 1 经前体细胞保持增值并抑制其分化。2003年，Lai，Ktl9】等报道发现从成年大鼠海 马区分离的神经前体细胞高表达SHH受体Patched，同时外源性的SHH可诱导神经前 体细胞呈SHH浓度依赖性增值。采用腺相关病毒载体转染体内海马区，神经前体 致大鼠未成年时就发育畸形，海马区和脑室下区神经前体细胞显著减少。并且认 为脑室下区神经前体细胞的减少归因于细胞的程序化死亡。证实了SHH对神经干 细胞生态位的维持起到重要作用，激活SHH信号通路可使发育成熟的脑组织内的 神经前体细胞增殖。 我们分离并纯化大鼠脑室下区神经干细胞，提取RNA、反转录PCR得到 通路下游基因的mRNA水平变化。本实验的结果表明(1)克隆得到SHH-N基因， rAAV-EGFP的对照组，Glil和N-myc的mRNA水平上调。 l期细胞 2003年kenneyl2l】等报道在颗粒神经前体细胞中过表达N-mye可使G 周期蛋白表达上调，但颗粒神经前体细胞的增值并不依赖SHH信号通路激活。同 时在体外培养的颗粒神经前体细胞中，激活SHH信号通路同时加入Mye拮抗物， 可减少细胞增殖。由此，认为在颗粒神经前体细胞中，N．mye是SHH信号通路的 靶基因，并调节细胞周期的蛋白的表达。 总之，我们认为在神经干细胞中，N．mye是SHH信号通路的直接靶基因。由 能不依赖Glil直接调控。N-myc在SHH信号通路的中调控细胞增殖的作用需要进 一步研究。 关键词：神经干细胞SHH信号通路N-mye细胞增殖靶基因 2 ConstructionandIdenti6cation ofSHH．NGeneAdeno．associated VirUS VectorandItsEffectionon GenesRelatedto ProliferationIn NeuralStemCells Master candidate：Liu degree Dongsheng Bo Supervisor：ProfessorZhang Major：Surgery Abstract Sonic a moleculeinthe hedgehog(sI-iri)isimportant signaling patternin