TLR4和MyD88在大鼠局灶性脑缺血耐受过程中的表达和作用.pdfVIP

·中文论著摘要· 88在大鼠局灶性脑缺血耐受过程中 TLR4及MyD 的表达及作用 刖舌 大部分的神经外科手术都会给患者带来脑缺血性的副损伤，给手术预后造成 极大的影响。为解决这一难题，人们在研究中发现短暂脑缺血、缺氧、内毒素、 促炎症细胞因子等因素预处理动物模型可诱导动物脑细胞产生耐受效应。预处理 耐受即为事先给予少于致死量药物或造成较轻微的炎症反应，从而缓解接下来的 致死损伤，产生一定的脑保护效应。据现有研究表明，这种耐受效应的产生与外 界的刺激的性质有很大关系，如脑缺氧预处理可通过细胞内线粒体结构改变调整 自身能量储备，从而减少了损伤性的脑缺氧伤害，预先给予动物小剂量刺激后将 明显降低致死剂量的所造成的动物死亡率【11。依照同样原理造成短时间人为缺血 损伤构造预缺血模型发现预处理还可诱使机体产生缺血耐受，可建立耐受状态保 护大脑免受致死性的缺血损伤‘21。在这些预处理实验中共同检测到了TLR4下调表 达引起了人们的关注。本实验立足现有研究成果为基础，进一步探讨预先给脑组 织一个小剂量的缺血再灌注损伤后是否对脑组织再次面临致死性缺血再灌注损伤 时起到保护作用，并进一步探讨TLR4蛋白在这种保护性作用机制中所起到的功 能。 材料与方法 按文献所述，建立ZeaLonga改良法大鼠大脑中动脉线栓法预缺血处理模型。 健康成年SD大鼠(中国医科大学实验中心提供)60只(体重220．250克，雄性)， 预处理组(n=20只)。C组为大脑中动脉线栓15min，A，B组做假手术处理，共同 饲养48小时后B，C组做损伤性缺血再灌注90min，A组做假手术处理，三组分 别于处理后12h、24h处死大鼠。处死大鼠取出鼠脑后做鼠脑冠状切片，丌C染色， 余组织采用westernblot方法进行分析蛋白表达。 结果当日禾 大鼠脑缺血模型建立成功。通过干湿法进一步检测大鼠各组问脑水肿程度分 析，我们可以检测到经过预缺血再灌注的大鼠脑组织，再次面临致死性缺血再灌 注伤害时其水肿程度明显降低。通过各组大鼠各不同时间点对鼠脑TLR4蛋白和 MvD88蛋白检测，我们发现，预短暂缺血再灌注损伤后大鼠鼠脑，当其再次面临 缺血再灌注损伤时，TLR4蛋白和MyD88蛋白表达均呈现了不同程度的降低，且 梗死面积也有所降低。但是TLR4、MyD88蛋白的表达水平有时间依从性，且随 TLR4、MyD88蛋白的表达升高梗死面积有一定程度的增大，进一步说明了TLR4 蛋白和MyD88蛋白的抑制表达缺血预处理脑保护机制中的重要作用。 关键词 缺血预处理，缺血再灌注，TLR4蛋白，MyD88蛋白，TOLL样受体。 2 ·英文论著摘要· Ex[ auandfunctionlunctionofTLR4andMVlJ芍芍lMvD88inthe offocalcalcerecerebralral|schemicischemictoler：toleranceol process rats precondition ective Obsj The of will theextra ofthecerebral majorityneurosurgicalproceduresbring injury ischemiatothe hasdramaticeffecton outcomes．Tosolvethis patient，which surgical that havefound animalmodelwit