不同剂量地塞米松对液压冲击伤脑水肿AQP4表达的作用.pdf

材料与方法……………………………………………11 结果……………………………………………………15多日木……………………………………………………1) 附图……………………………………………………17 附表……………………………………………………………………．20 讨论……………………………………………………22 小结……………………………………………………23 参考文献………………………………………………24 第二部分不同剂量地塞米松对大鼠液压冲击伤脑水肿AQP4 表达的影响 前言……………………………………………………．27刖舌……………………………………………………．27 材料与方法……………………………………………28 结果……………………………………………………3l 附图……………………………………………………34 附表……………………………………………………………………．．47 讨{仑………’……………………………………………51 小结……………………………………………………52 参考文献………………………………………………53 结论………………………………………………………………………………55 综述水通道蛋白4在创伤性脑水肿中的作用研究………56 致谢…………………………………………………………67 个人简历……………………………………………………．68 中文摘要 不同剂量地塞米松对液压冲击伤脑水肿 AQP4表达的影响 摘 要 第一部分 大鼠液压冲击伤神经功能评分与AOP4表达的关系 目的：建立液压冲击脑损伤动物模型，观察神经功能评分和AQP4 的表达规律，探讨神经功能评分与AQP4和脑水肿的关系。 按文献制作液压冲击伤动物模型。SO组动物常规麻醉开颅，但不进行液 压冲击，NC组不进行任何处理。 各时间点先行神经功能评分，再10％水合氯醛过度麻醉，断头处死，开颅 取脑，行HE染色和免疫组织化学染色方法检测AQP4。从损伤区前缘取 100mg左右脑组织应用干湿重法测脑组织含水量。损伤区后缘脑组织用于 免疫蛋白印迹(WesternBlot)检测AQP4蛋白表达。 结果： l 动物一般状况：大鼠在液压冲击伤后均立即出现前肢抱握屈曲、肌张力 增高、竖毛、弓背、心率增快等表现，且可出现呼吸暂停，持续时间约(15 ±2)s，一般可自行恢复呼吸。随后昏迷、反射减弱。清醒后精神萎靡不 振，活动减少。 2神经功能评分：TBI组与SO组比较，在伤后各个时间点评分降低 后逐渐升高。 3 组织学观察：损伤灶周围脑组织于伤后6h开始出现细胞水肿，伤后 12h细胞水肿程度较前明显，伤后24h水肿范围进一步扩大，水肿程度达 到高峰，并有胶质细胞的增生，伤后3h仍可观察到周围明显水肿，但较 中文摘要 24h时有所减轻，胶质细胞比之前增生明显。伤后7d水肿基本减退，胶 质细胞仍增生明显。 降，7d时[(80．45±O．7)％]基本恢复。 5 免疫组织化学：脑组织AQP4蛋白主要表达于星形胶质细胞和室管膜 细胞内，尤其富集于与毛细血管和软脑摸直接接触的星形胶质细胞足突 738+0．076)， 中。结果显示损伤组水肿脑组织AQP4于伤后6h开始增3n(o．1 但7d时仍高于SO组。 6 Westem 7d仍高于正常脑组织。 相关性(FO．84，P0．05)。 结论：液压冲击伤大鼠的神经功能障碍与继发性脑水肿密切相关， 其中AQP4通过介导脑水肿加重神经功能损伤。 关键词：神经功龇Bw；脑水肿；脑损伤；AQP4；冲击伤。 第二部分 不同剂量地塞米松对大鼠液压冲击伤脑水肿 ^0P4表达的影响 目的：建立液压冲击脑损伤动物模型，应用不同剂量地塞米松干预， 采用免疫