大鼠肠神经嵴干细胞的分离培养材料的选择和Wnt5a在大鼠肠神经嵴干细胞和其分化过程中的表达.pdfVIP

…………………………”1 …………………………··3 …………………………”6 …………………………”7 …………………………“8 …………………………1O 讨论…………………………………………………………………………………………………………18 结j沦…………………………………………………………………………………………………………21 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………22 五、参考文献…………………………………………………………………………23 六、附录 综j苤…………………………………………………………………………………………………………25 在学期间科研成绩………………………………………………………………“3l 致谢…………………………………………………………………………………………………………32 个人简介…………………………………………………………………………·33 ·中文论著摘要· 大鼠肠神经嵴干细胞的分离培养材料的选择及Wnt5a 在大鼠肠神经嵴干细胞及其分化过程中的表达 目 的 creststem 神经嵴干细胞(neural cells，NCSC)起源于胚胎期的神经管背侧， nervous 部分NCSC定向分化成肠神经系统(enteric system，ENS)的神经元和神经 neuralcreststem 胶质细胞，被称为肠神经嵴干细胞(gut 的发育异常会导致肠神经系统疾病，其数量、功能及分化细胞的类型在ENS发育 Malformations， 过程中起关键作用。已有研究证实，肛门直肠畸形(Anorectal ARMs)患者术后排便功能不良的部分原因是由末端直肠的肠神经系统的发育异常 Disease，HD)为小儿外科的常见疾病，其 引起，先天性巨结肠(Hirschsprung’S 病理基础也是先天性肠神经系统发育异常的结果。GNCSC的发现和体外培养的成 功，为我们利用GNCSC进行干细胞移植，从而彻底治愈先天性巨结肠及解决肛 门直肠畸形患儿术后便失禁等问题提供了一个很好的前景。 虽然近些年来关于GNCSC体外培养的文章不在少数，但是在GNCSC的分离 提取及培养的关键步骤上说法模糊，对于材料的选择也没有统一的标准。本实验 旨在完善GNCSC体外的培养方法，比较从不同胎龄大鼠胚胎及生后新生大鼠提 bodies，NLB)生长 取的GNCSC体外培养形成的神经球样结构(neurosphere．1ike 情况，探讨最佳的取材时机及培养方法。 近年的文献证实Wnt蛋白通过不同信号分子间的相互作用，触发了调节细胞 生长、迁移、分化及发育等多方面的复杂信号级联反应，其中对Wnt5a的研究正 在逐渐增多，Wnt5a在调节中枢神经系统神经干细胞的增殖分化中起重要作用， 本文通过免疫荧光染色技术研究Wnt5a在GNCSC增殖及分化过程中的表达情况， 研究Wnt5a在ENS形成及发育过程的可能调节作用。