大鼠视网膜兴奋损伤中HSP70及TNF-α表达的相关性研究.pdfVIP

大鼠视网膜兴奋损伤中HSP70与TNF—Q表达的相关性研究 摘要 目的探讨大鼠视网膜兴奋损伤中HSP70与TNF-a表达的相关变化。 方法健康成年清洁级Wistar大鼠50只随机分为三组，正常对照组(5只)、阳性 Il 1 后实验组和阳性对照组均做单眼的玻璃体腔注射NMDA(280mmol／1)，并做好 标记。NMDA注射后2h，8h，16h，24h，实验组和阳性组各组均随机处死5只大鼠。 正常对照组不做任何处理，可以于任何时间点处死。HE染色光镜下观察各组视网膜 组织的形态学变化，实时定量RT—PCR方法观察视网膜TNF-a 达的变化。 结果 1．HE染色：正常对照组大鼠视网膜组织结构层次清楚，染色均匀，细胞形 态规则。阳性对照组造模后2h，神经节细胞开始水肿；造模后8h，神经节细胞水肿 最严重，其内可见空泡，视网膜增厚；造模后16h，神经节细胞水肿较前减轻，排 列疏松，形态不规则，可见核固缩，数量减少；造模后24h，神经节细胞数目减少， 排列紊乱，核固缩明显，神经纤维层、神经节细胞层变薄。各时间点实验组与阳性 对照组相比，视网膜的厚度较厚，存活的视网膜神经节细胞的数量较多，损伤均轻 于阳性对照组。2．荧光定量RT-PCR：正常对照组大鼠视网膜未见TNF-QmRNA表 达，可见HSP70微量表达。阳性对照组中NMDA注射后2h，TNF—amRNA水平较正常 对照组上调(PO．05)，注射后8h，TNF—Q 表达量降低，但仍高于对照组(PO．05)，注射后24h，TNF-QmRNA表达量与16h mI诅NA水 平较正常对照组上调(PO．05)，注射后8h，HSP70mRNA水平明显上调(P0．05)，注 射后16h表达量达高峰(P0．05)，注射后24h，HSP70mRNA表达量降低，较正常对 TNF-Q 照组增多(P(O．05)。实验组中硫酸锌注射后10hmRNA未见表达，NMDA注 射后2h，TNF—a mRNA水平较正常对照组上调(P(O．05)，较阳性对照组下降 (P0．05)，注射后8h，TNF—amRNA水平达高峰(P(O．05)，较阳性对照组下降 (P0．05)，注射后24h，TNF—Q HSP70 组下降(P(O．05)，较正常对照组增多(P0．05)；硫酸锌注射后10hmRNA水 平较正常对照组上调(P0．05)，NMDA注射后2h，HSP70mRNA水平明显上调(P(O．05)， 较阳性对照组增加(P0．05)，注射后8h，HSP70mRNA水平达高峰，与2h的无差别 (p0．05)，较阳性对照组增加(PO．05)，注射后16h，HSP70 mRNA水平与8h的无 差别(p0．05)，较阳性对照组增加(P0．05)，注射后24h，HSP70 mRNA水平下降， 较阳性对照组增加(PO．05)。 结论在视网膜兴奋损伤中，硫酸锌可增2DHSP70的表达量，降低TNF-Q的表达量， 作用。 硕士研究生：董丽娟(眼科学) 指导教师： 王大博教授 关键词： 硫酸锌； 熟休克蛋白70；肿瘤坏死因子Q The onthe betweenHSP70andTNF．aonretinal study relationship in in excitotoxicity．i ury tcartsbAs．tar To