大鼠视网膜血管的电紧张传导的探究.pdfVIP

一———J监 大鼠视网膜血管电紧张传导 及血管紧张素II对其影响的研究 中文摘要 第一部分：大鼠视网膜血管的电紧张传导 研究目的在于探讨视网膜血管各级血管之间相互的电紧张联系，进一步了 解视网膜血管收缩舒张的自主调节机制。选用成年Long—Evans大鼠，新鲜分离 视网膜血管，台盼蓝染色观察其细胞活性，玻璃电极封接血管壁层细胞，穿孔 膜片钳单记录观察各级血管电流．电压(I．V)关系，并利用穿孔膜片钳双记录观 察各级血管电紧张传导，探讨其电紧张传导模式。 结果显示：新鲜分离的视网膜血管可稳定获得，按血管管腔大小、壁层细 胞密度和形态，可将获得的视网膜血管分为第二级小动脉、第三级小动脉及毛 细血管三级。各级血管的细胞的成活率为90％以上，显微镜下清晰可辨各级血 管壁层细胞，适于膜片钳记录其离子变化；视网膜各级血管壁层细胞单一电生 4-1 4-1 mV(n=29) 理记录显示，各级血管的静息电位为．38 mV(n=27)，一42 和一45-4-1 4-19 胞膜电压为．50mV时，各级血管的输入电阻分别为：175MQ(n=27)，151 4-9 4-15 MQ(n=29)和127MQ(n=10)，单因素方差分析无明显统计学差异(尸 =0．58)。于壁层细胞行膜片钳双记录，结果发现，电紧张传导沿毛细血管水平 lam的衰减仅为 轴向最为高效，其电紧张传导比为0．564-O．15(n=27)，每100 2 4-0．09(n=22)，每 4-2％伍=27)；在第三级小动脉，其电紧张传导比为0．27 4- 100 0．19 fn=10)，每100gm的衰减为6士8％(n=10)。三组间的衰减率没有统计学 差异。 研究发现，视网膜血管的电紧张传导主要通路为壁层细胞一内皮细胞一壁 层细胞，各级血管内部的水平轴向传导高效，尤以毛细血管传导效率最高，传 导的衰减主要发生于壁层细胞和内皮细胞之间，以及跨各级血管的水平轴向传 导之间。 盟态堂盟±诠塞 一 第二部分：血管紧张素II对大鼠视网膜血管电紧张传导的影响 目的在于研究血管活性因子——血管紧张素II对视网膜血管自主调控的影 响。选用成年Long．Evans大鼠，新鲜分离视网膜血管，免疫组织化学显示血管 紧张素II1型受体在血管上的表达，利用穿孔膜片钳单记录观察500nM血管紧 张素II对视网膜各级血管电生理的影响，利用钙离子显像观察500nM血管紧张 素II在视网膜各级血管壁层细胞引起的细胞内钙离子的变化，并利用穿孔膜片 钳双记录观察其对视网膜血管电紧张传导的影响。 结果显示：视网膜各级血管均表达血管紧张素II1型受体，形态学分布未 见明显差异。500nM血管紧张素II引起壁层细胞非选择性阳离子通道开放，电 流产生主要部位为毛细血管，从．108mV至．38mV，产生的内向电流明显大于生 而，在第三级小动脉和第二级小动脉，500nM血管紧张素II引起的电流变化明 显小于毛细血管的电流变化，与生理对照相比亦无统计学差异。500nM血管紧 张素II引起壁层细胞内钙离子升高的主要部位亦是毛细血管，其周细胞钙离子 浓度改变最大值达325±20nM(n=81)，明显高于第三级小动脉肌细胞钙离子 浓度变化(55±3 度变化(10±2 各级血管水平轴向电紧张传导(每100Irtm衰减率～50％)，但是对壁层细胞．内皮 细胞之间的传导无明显作用。 研究发现：在视网膜血管，虽然血管紧张素II1型受体分布于视网膜各级 血管，其介导的非选择性阳