大鼠颅脑损伤后早期癫痫发作观察和海马改变.pdfVIP

目 录 中文摘要…………………………………………………………………．．1 英文摘要 …………………………………………………………………．．5 研究论文 大鼠颅脑损伤后早期癫痫发作观察及海马改变 前言日lJ舌 ………………………………………：…………………………1—0…………………………………………………………………． 材料与方法……………………………………………………………10 结果 …………………………………………………………………．13 附图 …………………………………………………………………．16 附表…………………………………………………………………．19 讨论…………………………………………………………………．20 参考文献………………………………………………………………26 综述大鼠外伤后癫痫动物模型及其癫痫机制研究进展………………29 致谢………………………………………………………………………39 个人简历………………………………………………………………．．40 中文摘要 大鼠颅脑损伤后早期癫痫发作观察及海马改变 摘 要 目的：制作大鼠颅脑液压冲击伤后早期癫痫发作模型，观察不同打击 力度下其行为学改变及脑电图异常；同时结合海马的胶质纤维酸性蛋白表 达和海马苔状纤维变化，探讨外伤后早期癫痫的发作机制。 方法： 1．大鼠颅脑液压冲击伤致早期癫痫发作动物模型制作 10只，不给任何处理。②对照组(假手术组)10只，给予实验组大鼠相 同的麻醉和手术，但不给予打击。③手术组30只，按照不同打击力度 (0．1kPa、0．2kPa、0．3kPa)分为3个亚组，每个亚组10只。 10％水合氯醛腹腔麻醉后，纵行切开颅顶皮肤，在左侧项骨(距矢状 缝，冠状缝各5ram)处用牙科磨钻去除直径5mm的’目’窗，保持硬膜的完整， 将液压打击装置的打击管固定于骨窗，聚羧酸锌水|、．J汀固定密封连接处。 用动物立体定向仪将大鼠固定，待大鼠意识部分清醒后，调整致打击力分 术后大鼠自由进食水，不能进食水者给予鼻饲进食，致手术7天时处死。 2．伤后行为学观察及脑电监测 伤后进行行为学观察：观察不同力度冲击伤后大鼠癫痫发作的时间、 程度，癫痫发作严重程度可根据改良过的Racine评分标准进行判定：0 级为无任何可探测到临床征象的脑电图型癫痫：I级为口面部痉挛，点头； II级为一侧前肢阵发性抽搐；III级为两侧前肢痉挛；4级为前肢阵挛和 强直；V级为前肢阵挛，强直和松弛。癫痫平分0一II级被认为是局部型， 评分工I工一V级被认为是继发性全身性癫痫。整个监测阶段有2次或2次 以上癫痫的动物，被认为有癫痫发作。 同时进行伤后脑电图监测3天，伤侧脑部测量电极埋放固定：皮层浅 层电极位置为前囟后1．0mm，中线旁2．O姗；海马电极：前囟后3．8mm， 慢复合波时确定为有癫痫样发作。 中文摘要 3．大鼠海马区域改变 3．1海马区域病理改变 随机将每个亚组中的5只大鼠在伤后7d时候处死，经左心室一升主动 以海马为中心向两侧连续冠状切片，片厚5岫，一套切片常规脱水，透明， 浸蜡，做苏木素一伊红(HE)染色。对照组按同样方法取脑，做HE染色。 3．2海马区域GFAP检测 各组切片常规脱蜡、至水，用链霉素抗生物素蛋白一过氧化酶(SP) 免疫组织化学染色试剂盒进行GFAP染色，镜下观察，采集图像。 3．3．海马苔藓纤维Timm染色 将3个亚组模型制作后的15只大鼠于1周时麻醉后处死，迅速开胸， 内室温孵育1．5小时，自来水冲洗，脱水，透明，封固，镜下观察、采集 图像，进行统计学分析。对照组同样方法Timm染色。 结果： l行为学表现 癫痫发作频率和强度随打击力度的增加而增加。轻度(0．1kPa)打击伤 组未见有癫痫行为，只有伤后弓背、抖须等表现。中度(0．2kPa)冲击伤后 作7只，表现为肢体或全身阵发性抽搐发作，严重者出现惊厥或全身性强 直一阵挛发作；部分发作3只，行为学表现为刻板样点头、咀嚼、面部抽 动等行为发作。 2脑电图表现 对照组大鼠脑电图均表现为Q波和B波为主要节律的基础波。实验组 3个亚组伤