大鼠脑积水侧脑室周围神经干细胞的实验探究.pdfVIP

大鼠脑积水侧脑室周围神经干细胞的实验研究 硕士生姓名：董安石 指导教师：吴春明教授 指导小组：刘荣耀教授 专业名称：外科学 摘要 目的：枕大池内注射高岭土法建立大鼠交通性脑积水模型及通过观察大鼠侧 脑室周围神经干细胞的变化，探讨其病理生理过程和修复机制，为寻找治疗交通 性脑积水提供新的治疗方法和恰当的治疗时机提供理论依据。 方法： 70只6周健康Wistar大鼠随机分为对照组和实验组各35只，对照组 个亚组。实验组大鼠麻醉满意后固定备皮、消毒，头置于木板斜坡上，暴露头颈 交界处。切开皮肤，钝性分离肌肉暴露寰枕筋膜。微型注射器穿刺寰枕筋膜出现 落空感后立即停止进针，缓慢抽出无色澄清脑脊液O．05砌，然后向枕大池内缓慢 头低位15．20分钟。对照组大鼠相同位置抽出无色澄清脑脊液O．05删后注射相同 体积的无菌生理盐水。分别于注射高岭土、生理盐水后3天、1周、2周、3周、4 周行头MRI筛选出满意的动物模型，并于当天麻醉后打开胸腔、暴露心脏、夹闭 胸主动脉及下腔静脉，医用输血器针头沿心尖插入升主动脉，剪开右心耳。用生 理盐水进行快速心脏灌洗至右心耳流出无色澄清液体后改用4％多聚甲醛快速灌 注至双上肢出现细微震颤，双上肢僵硬，颈部僵硬。行断头取脑，将脑组织放至 4％多聚甲醛后固定12小时，依次20％、30％蔗糖梯度脱水各1天，直至脑组织完 全沉底。将组织用OCT胶包埋，放置液氮表面速冻20秒钟，放入．30C恒温冰冻 切片机切片，片厚为10微米。应用免疫组织化学方法染色，观察大鼠侧脑室周围 nestin阳性细胞形态分布及变化。 结果：实验组28只大鼠成功诱发脑积水并完成实验过程，对照组30只大鼠 完成整个实验过程。对照组大鼠侧脑室无明显扩大，各对应时间点侧脑室指数大 致相同，P0．05。差别无统计学意义。实验组大鼠脑室随时间延长进行性扩大，与 对照组各时间点比较P0．01，差异具有统计学意义。对照组侧脑室周围nestin阳性 细胞数平均193±20．3并维持，各对应时间点之间差异无统计学意义。脑积水造 性细胞。 结论：枕大池内注入高岭土法可成功制作出交通性脑积水动物模型，可用于 脑积水疾病的实验研究。侧脑室周围神经干细胞数目在脑积水早期迅速达到高峰 并随着时间变化逐渐下降直至消失。考虑可能与侧脑室机械性扩张压迫周围组织 引起缺血、缺氧有关。神经干细胞参与了脑积水病理生理变化及修复过程。 关键词：大鼠脑积水动物模型神经干细胞 2 ofneuralstemcellsaroundthelateral Experimentalstudy ventricularzoneofthe rats hydrocephalus Master Anshi degreecandidate：Dong WuChun Supervisor：Professorming Liu Vice-supervisor：Professorrongyao Major：SuBe巧 Abstraet establishthe ratmodelthe Objective：To communicatinghydrocephalusby ofkaolintothecistemaandobservethe ofneuralstemcells injection magna