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大鼠脑缺血再灌注后HSP20及Bcl-2的表达及丹红注射液干预的影响
摘 要
目的:
shock
检测SD大鼠脑缺血再灌注中小热休克蛋白20(heatprote洫
cell
HSP20)、B细胞淋巴瘤/白血病.2(B
在脑组织中的动态变化,分析二者之间可能的关系,探讨其在脑缺血
再灌注中的作用。研究丹红注射液对sD大鼠脑缺血再灌注中HsP20、
Bcl.2的影响,阐明丹红注射液可能的机制。
方法:
将2509一3209雄性健康SD大鼠60只,随机划分成四组:正常对照
组(nonnal O)和脑缺
Longa法建立SD大鼠大脑中动脉缺血两小时再灌注模型,其中IR组
和药物干预组又分为四个亚组,每个亚组5只动物,分别是:6小时
后SD大鼠的神经功能缺损。应用皿染色法观察大鼠脑组织病理学
变化情况;应用免疫组织化学法来检测Bcl.2、HSP20的阳性细胞表
达水平的动态变化;应用实时荧光定量PCR方法对标本中HSP20
m砒悄的表达及扩增倍数进行测定。
参}申
二口才譬:
1.髓染色:假手术组和正常对照组可见SD大鼠脑组织中神经
元结构及形态正常、无间质水肿、没有明显的梗塞灶。脑缺血再灌注
组可见神经元细胞坏死产生,随着时间的推移病灶侧神经元坏死变性
l
现象加重并伴有胶质细胞增生。而在药物干预组和IR组各个相同时
间点的亚组相比较,可以看出药物干预组大鼠脑组织损伤程度明显轻
于缺血再灌注组。
2.免疫组织化学结果:(1)HSP20在假手术组和正常组的个时间点
偶见阳性细胞,两组比较无统计学意义(PO.05)。在脑缺血再灌注6h
组中HSP20的表达有所升高,3d时到达高峰,之后呈逐渐下降趋势,
7d组阳性细胞数较3d组也有明显减少,但仍高于假手术组和正常组。
表达主要位于海马区的神经元、神经胶质细胞胞浆中及血管内皮细
胞。IR组与假手术组及正常对照组比较HSP20的表达有差异,其差
中表达开始升高,并迅速升高在1d时达到高峰,之后随着时间的推
移逐渐下降,7d组阳性细胞数较3d组也有明显减少,但依然比假手
术组及正常组高;Bcl.2阳性细胞数在IR组与假手术组的比较中有差
的表达趋势与IR组基本相同,但阳性细胞数明显高于IR组,且其差
异有统计学意义(PO。05)。丹红药物干预组与脑缺血再灌注组中Bcl.2
的表达趋势基本相同,但阳性细胞数却明显高于IR组,并且差异有
统计学意义(Po.05)。
3.ImPCR检测结果:在脑缺血再灌注组中HSP20mRNA在6h
时开始升高,3d时达到最高,之后逐渐降低但7d组仍高于正常对照
组及假手术组,与正常组和假手术组比较有统计学意义(PO.05)。在
mRNA的表达趋势与IR组基本相同,同样
丹红药物干预组中HsP20
在6h时开始升高,3d时达到最高后开始缓慢下降,但HSP20试刚A
表达量却明显高于IR组,且其差异有统计学意义(PO·05)。
结论:
1.脑缺血再灌注后HSP20、Bcl—2表达均升高
2.丹红注射液可以上调HSP20和Bcl.2的表达,并且可能有神经保
护作用
关键词:脑缺血再灌注,HSP20,Bcl.2,丹红注射液,SD大鼠
III
ABSTRACT
objectiVe:
tissue
inbrain
the Variation bcl-2
dyn锄ic ofhsp20跚d
Inspect
SD their
c
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