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干扰素-λ1对慢性HBV感染青少年患者外周血清来源树突状细胞功能的作用
中丈摘要
干扰素.九1对慢性HBV感染青少年患者外周血来源树突状细胞
功能的影响
摘 要
B
目的:现研究认为乙型肝炎病毒(hepatitis
宿主免疫应答与免疫反应引起肝细胞的损伤和破坏,由于宿主的免疫反应
不同HBV感染所引起的临床表现和转归各不相同。根据免疫学特点,婴
幼儿期HBV感染自然过程在临床上可以分为四期,①免疫耐受期;②免
的确切机制尚不明确。HBV感染后树突状细胞(dendriticcell,DC)抗原提
呈功能低下可能是HBV感染慢性化的原因之一。DC是目前所知机体内功
能最强的APC(antigen.presenting
体内免疫反应的过程,因而DC已成为机体免疫应答的中心环节。DC最大
特点是能够显著刺激初始T细胞进行增殖,而巨噬细胞和B细胞仅能刺激
己活化或记忆性T细胞,所以DC在免疫应答诱导中具有独特地位,是机体
矛I:l
发现干扰素入主要来源于DC并且对DC的成熟和功能具有重要调节作用。
研究发现IFN.入,能诱导DC的成熟以及增强它的抗原提呈功能。关于报道
干扰素九在丙型病毒性肝炎中的研究进展很多,但在慢性HBV感染过程中
对DC功能的影响在国内外报道很少。
本研究旨在探讨干扰素九,对HBV慢性感染青少年患者免疫耐受期与
免疫清除期外周血来源DC细胞功能的影响及临床意义。
方法:选取青少年慢·t生HBV感染者34{Y4,其中免疫耐受期l8例,免
疫清除组16例,健康对照10例。所有慢性乙型肝炎患者均行肝组织活检,
炎症分级为G0~G4,纤维化程度分为SO~S4。
1体外DC培养:留取受试者和正常者新鲜外周静脉血,密度梯度离心法
中文摘要
分离PBMC,无血清培养基悬浮沉淀细胞,收集贴壁细胞分-)8.:单独
组(重组人白介素一29);正常培养组(重组人白介素。4、重组人粒细胞一巨
噬细胞集落刺激因子);IFN.九,组(重组人白介素.4、重组人粒细胞一巨噬
细胞集落刺激因子和重组人白介素.29)共同培养,均培养7天。
2培养过程中在倒置显微镜下观察各组DC成熟状态
染色,流式细胞仪检测表达情况。
4收集细胞培养上清液,ELISA法检测I岍.v,IL一12分泌情况。
结果:
1
有形态改变,延长至1
细胞体积小;诱导培养2天后可见贴壁细胞伸展,形态明显改变,培养5
天后细胞形态不规则,粗细不等的毛刺多而密,成典型的DC形态;第7
成簇,并且大量突起交织。
2流式细胞术检测细胞表面标志结果:培养7天后,免疫耐受组和免疫清
期患者的表达明显高于免疫耐受期,差异具有统计学意义(pO.05)
3细胞培养上清液检测结果:免疫清除期比免疫耐受期患者DC分泌IL.12
能,差异具有统计学意义(pO.05)。
结论:
1利用患者外周血获取PBMC,运用贴壁培养法去除悬浮细胞可成功获得
后能明显促进和诱导外周血来源DC的成熟。+
中文摘要
2慢性ItBV感染者中免疫耐受期患者DC功能较正常人和免疫清除期患者
明显降低,DC功能的缺失是青少年HBV感染后免疫耐受的原因之一。
3经体外IFN一九,处理后慢性HBV感染者中免疫耐受期和免疫清除患者的
能,IFN一九1具有很强的免疫调节能力。IFN.九1有可能成为治疗慢性乙型肝
炎的新选择。
关键词:乙型肝炎病毒;慢性乙型肝炎:干扰素.九1;树突状细胞;细
胞培养
英文摘要
The Dendritic
Influenceof on BloodSource
IFN一九1 Peripheral
CellinAdolescent HBVInfection
PatientsofChronie
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