海湾战争综合大鼠模型海马BDNF、TrkB以及CREB的表达.pdfVIP

海湾战争综合征大鼠模型海马BDNF、TrkB 以及CREB的表达 硕士生姓名：吕 彦 指导教师：曲方 教授 指导小组：张景华主治医师 何凡主治医师 专业名称：神经病学 摘要 目的：参加上世纪九十年代早期的海湾战争的部分美国军人(GWV)，在战 后不久出现了持续的、难以处理的健康问题，用目前的医学以及精神病学理论不 能明确诊断，被称之为海湾战争综合征(GulfWar War 争疾病(Gulf GWS分为3组症状，即非运动性疲劳、感情或认知障碍(焦虑、抑郁、情绪反复 无常、注意力不集中、睡眠障碍)、骨骼肌肉系统异常(2个及以上关节、肌肉疼 痛)，至少存在一种及以上的症状。GWS的病因包括贫铀武器、溴化吡啶斯的明(PB)、 杀虫剂(DEET)、严重的心理应激和创伤、独特的科威特油井火焰烟雾、疫苗接 种、胃肠道以及呼吸系统的感染性疾病等等。根据海湾战争流行病学研究，一致 认为PB作为预防神经毒气的应用和DEET的使用与GWS的发生率有明显的相关 性。根据MRI技术测量结果，GWS的海马体积明显小于正常人。脑源性神经营养 因子(Brain．derivedfactor，BDNF)是脑中含量最多的神经营养因子， neurotrophic related kinase，T出)B受 主要分布在海马神经元。酪氨酸蛋白激酶(tyrosinereceptor (cAMP element response binding 海马的损伤密切相关。本实验的目的，建立海湾战争大鼠模型和慢性应激大鼠模 讨GWS海马的损伤是否与BDNF的表达改变有关。 方法：采用慢性限制性应激建立慢性应激大鼠模型，参考Abdel．Rahman等人 研究建立海湾战争综合征大鼠模型。实验分3组：对照组：饮水，70％乙醇皮下注 后，每组取一半实验动物制备成常规石蜡切片，采用SABC法行免疫组化染色， CREB进行免疫印迹分析。 结果：1、体重观测：实验28天结束后时，各组大鼠的体重均有所增加。对 照组大鼠体重增加42．65％，限制性应激组增加42．30％，GWS模型组增加37．05％。 三组大鼠体重增幅之间无统计学差异(PO．05)。2、免疫组化结果：限制性应激 组与对照组相比较、GWS模型组与对照组相比较、模型组与限制性应激组相比较， BDNF的平均光密度值降低，均有显著差异(Po．05)。限制性应激组与对照组相 比较、模型组与对照组相比较、模型组与限制性应激组相比，TrkB的平均光密度 值下降显著(P0．05)。限制性应激组与对照组、模型组与对照组相比较、模型组 与限制性应激组相比较，CREB的平均光密度值降低，均有统计学差异(Po．05)。 3、Western blot分析结果：限制性应激组与对照组比较，BDNF的表达量明显减少 均有明显减少(P0．05)。限制性应激组与对照组比较，TrkB的表达量明显减少 有明显减少(Po．05)。限制性应激组与对照组比较，CREB的表达量明显减少 均有明显减少(P0．05)。 结论：1、慢性限制性应激、PB／DEET处理对大鼠体重增幅无明显影响。2、 在慢性应激海马的病理过程中扮演着重要角色。3、GWS模型大鼠海马BDNF、 TrkB、调节因子CREB的表达，导致海马神经元的损伤，进而使GWS患者出现 相应的临床症状。 TrkB 关键词：海湾战争综合征BDNF CREB海马 2 Brain—derived related Alterationsof factor，tyrosine neurotrophic kinas