肝动脉断流对肝癌侵袭转移潜能的影响及其机理及干预研究.pdfVIP

复旦博。：论文 中文摘要 肝动脉断流对肝癌侵袭转移潜能的影响及其机理和干预研究 中文摘要 “去血供疗法”是临床上针对不可切除肝癌常用的治疗手段，主要包括肝动脉 emboIization， 结扎(Hepaticane拶ligation，HAL)，经肝动脉栓塞(Transarterial TAE)和经肝动脉化疗栓塞(Transanerial 其中TAcE是目前中晚期肝癌的标准治疗手斟31。另外，近年成为终末期肝癌标 物性去血供”的范畴‘3，41。值得注意的是，虽然“去血供治疗”疗效被多数临床随机 对照研究或荟萃分析证实，但其也存在以下不确定性：①治疗不彻底，残留少数 肿瘤细胞，成为日后肝癌复发、转移的来源【l】。②疗效短暂，仅能延缓而不是阻 断肝癌发展，病人中位生存期最多延长至16个月【2，31。③少数临床观察发现治疗 本身促进残癌细胞的侵袭、转移，甚至导致病人生存期缩短【5母】。④多中心临床 21，可 随机对照分析提示术前TAE／，rACE不能延长可切除肝癌病人的生存期【协1 能与“去血供”后肿瘤肺转移增加有关一J。 基于上述发现，本实验拟研究“去血供治疗”对残余肝癌侵袭、转移潜能的影 响，分析其分子机制及可1-预靶点，为进一步提高“去血供”疗效提供理论依据。 1，建立能模拟临床“去血供治疗”的人肝癌裸鼠原位移植并HAL模型(中华实验 外科杂志，2009，26：115一117) 由于获取“去血供治疗”后临床肝癌样本较为困难，开展“去血供”后残余肝癌 生物学特性的研究多通过动物实验来完成，主要选用动物源性肿瘤，不具有人源 性背景【‘3郴】；且一般采用经血管直接注入癌细胞的“实验性转移模式 metastatis)’’【16】，不能完整反映肝癌侵袭、转移的全过程。本实 (Experimental 细胞行裸鼠原位种植，继以HAL模拟临床“去血供”，为开展相关研究提供了合 适的体内实验平台。 该动物模型特征如下：人肝痈裸鼠原位种植成瘤率几近l00％(56／56)；较高 转移潜能的MHCC97(或带红色荧光标记的MHCC97．R)移植瘤自发肺转移率 复旦博士论文 中文摘要 (或带红色荧光标记的Hep3B．R)移植瘤腹腔转移率也超过50％。通过分析肝 脏移植瘤生长曲线、瘤内血供(彩色多普勒超声)及侧枝循环建立时间，选定原 位接种肝癌术后2周为HAL手术时机。HAL手术成功率达到93．3％(28／30)。 (HypoXia．inducedf；lctor-la，HIF．1俚)蛋白水平显著增加(尸O．05)【1蜘，证实“去 血供”有效。 考虑到“去血供治疗”主要的生物学效应是诱发或加重瘤内缺氧‘19，20】，为进一 步分析缺氧对肿瘤细胞生物学特性的影响，本研究用氯化钴(coCl2)诱导肝癌 细胞缺氧建立了体外模型。通过分析其量效性，选定100“mol／L作为CoCl2诱导 肝癌细胞缺氧的有效浓度；同时对比其时效性，发现处理肝癌细胞12h后，细胞 验的有效时间段。 2，“去血供治疗’’抑制肝癌原发瘤生长，但促进残癌的侵袭、转移(c柚cersci％％ 2010，1叭：120-128 利用上述HAL模型，本研究观察“去血供治疗”对肝癌原发瘤生长和残癌细 胞侵袭、转移潜能的影响。 结果发现，(1)HAL后肿瘤组织坏死增加，残癌细胞增殖抑制，原发瘤体 积缩小——MHCC97．R移植瘤体积：HAL组2．O士O．2cm3谌假手术组4．O士0．6 cm3惟假手术组4．6士O．9 cm’(PO．01)；HepG2．R移植瘤体积：}L地组2．8士O．2 mm3(尸O．05)。(2)但残癌细胞的局部侵袭和远处转移明显增加，表现为；① 肝脏原发瘤组织学显示，HAL导致肿瘤包膜破坏、残癌细胞局部侵袭，微血管 侵犯和癌栓形成。②体视荧光显微镜显示，HAL增加肝癌移植瘤肝内、外转移 (MHcc97．R：肝内播散+腹膜种植+