肝癌患者血浆RASSF1A,APC基因甲基化检测的临床运用价值.pdfVIP

中文摘要 摘 要 目的：抑癌基因RASSFl 途径中的分子，以往已有一些研究证实在原发性肝癌(以下简称肝癌)组 织中可检测到这两个基因的异常甲基化，但研究结论尚不一致。大多关于 织，但组织标本不适宜肝癌的筛选及早期检测，相较而言血浆标本比较容 易获得。一些研究已经证明在肿瘤组织与配对血浆样本中DNA甲基化的 改变有很高的一致性，表明血浆中DNA甲基化检测作为肿瘤标记物有潜 在效用。本研究采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylationspecific 料及生存期预后的关系，为研究用于肝癌筛查、临床诊断及预后判断的血 清学标记物提供更多依据。 方法： 1研究对象：2007年5月至2011年9月于河北医科大学第四医院消 断及分期标准(广州，2001)对肝癌进行临床诊断与分期，肝癌患者I期、 通过电话联系对肝癌患者进行随访。 2抑癌基因启动子区域的甲基化检测方法： DNABloodMini 本，用QIAamp Kit试剂盒提取血浆DNA，经亚硫酸盐 处理后，用Wizard DNA纯化纯化试剂盒纯化血浆DNA，具体步骤按试 中文摘要 非甲基化的引物序列为：上游引物15’￡虱订兀Ⅲ叮K瓢AG阳瓜ⅪK狐弓’，下游引 Kit，扩增产物通过电泳 目的片段的扩增，扩增反应体系为2×HSTMTaqMix 凝胶成像系统进行甲基化结果分析判定。 1 3统计学分析：所有数据均使用SPSS3．0统计软件进行统计学分析， P0．05认为有统计学意义。 结果： 比较 RASSFlA基因启动子区甲基化阳性率在肝癌和肝硬化血浆中分别为 51．96％(53／102),I 对肝癌组及肝硬化组血浆甲基化进行比较，差异有统计学意义 进行比较，差异均有统计学意义(P--O．000，P=0．000)。 APC基因启动子区甲基化阳性率在肝癌和肝硬化血浆中分别为 对肝癌组及肝硬化组APC基因甲基化进行比较，差异有统计学意义 (x2=l 进行比较，差异均有统计学意义(P=O．000，P=O．000)。 硬化、有无门静脉瘤栓及临床分期相关。RASSFlA基因甲基化阳性率在 肿瘤多发和肿瘤单发肝癌血浆中分别为60％*I36．54％，P=0．018，在伴有 中文摘要 55．81％和3 64．7 12。 1％和38．24％，P=0．0 27例发生了APC基因甲基化，占46．5％。 1 02例肝癌患者中，两种抑癌基因均未发生甲基化的占29．41％ 基化状态不存在相关关系。 4血浆RASSFlA，APC基因甲基化检测对肝癌的诊断价值 基因甲基化检测对肝癌诊断的灵敏度为70．6％，特异度为86．7％。 10．05)。 率比较，差异有统计学意义(P=0．01 APC基因甲基化阳性组的平均生存期为(1 异无统计学意义(P=0．1750．05)。 中文摘要 (P=O．0190．05)。 进一步COX多因素分析结果提示，AFP、临床分期、治疗方式及门静 少一个基因甲基化状态阳性患者，基因甲基化状态检测结果可以作为评价 生存期预后的独立预后因子(P=O．0190．05)。 结论： l肝癌组血浆甲基化阳性率显著高于肝硬化组及健康人组，说明 RASSFIA，APC基因甲基化在肝癌形成中可能起一定作用。 义，且两种基因甲基化状态与肝癌患者有无门静脉瘤栓组相关，RASSFIA 甲基化状态可以反映肝癌患者病情与预后。 预后的独立预后因子。 床应用；预后 英文摘要 ClinicalvalueofRASSFlA