雌激素通过α-受体亚型途径促进内皮祖细胞增殖及迁移.pdfVIP

雌激素通过Q一受体亚型途径促进内皮祖细胞增殖和迁移 摘 要 动剂)对内皮祖细胞(endothelialcells progenitorEPCs)增殖和迁移的影响。 探讨E2可能通过何种ER亚型起作用。方法：(1)脐带血单个核细胞的分 离：抽取健康足月孕产妇胎盘脐带血60IIll，按20U／hl加入普通肝素抗凝， 采用明胶沉淀联合密度梯度离心法分离获得单个核细胞，并进行细胞活力 计算(死细胞着蓝色、活细胞不着色)，活细胞占98％以上可进行接种，上 于纤维连接蛋白包被的25 添加lO％胎牛血清、1％青链霉素(1万单位／IIll)、VEGF 50ng／ml、b．FGF 以内贴壁，24小时后取未贴壁细胞继续培养至第四天，用磷酸盐缓冲液洗 掉未贴壁细胞，加培养液培养至第七天，进一步用磷酸盐缓冲液洗掉未贴 壁细胞，贴壁细胞供试验用。(3)EPCs鉴定：取细胞爬片先后加入硫氰酸 液接种于Coster 600u1的培养液，并分别在培养液中加入不同浓度的E2、PPT和DPN孵 育24h(实验均设双复孔)。于高倍镜下计数定向迁移至滤膜下表面的细胞数 核细胞开始贴壁；7天后呈簇状生长，并有一定方向性；9天可见多个血岛 样细胞团出现。免疫荧光鉴定显示90％的贴壁细胞呈双荧光染色阳性， m01／L、1×10。7 影响。E2在1×lO。10m01／L、1×10‘9m01／L、1×lO’8m01／L浓 2 m01／L 用。说明E2主要通过0【受体亚型途径刺激EPCs的增殖和迁移。 关键词：17p一雌二醇；内皮祖细胞；PPT；DPN；增殖；迁移 3 Estrogenpromotes and ofendotheUal proliferationmigration ceUs progenitor Via仅一receptorsubtypes isto thee虢ctof Abstract：bjec仉e：Aim study estrogen(E2)a11d es仃ogen rec印to“ER)agonists PPT(selectiVe EI地agonist)andDPN(selective E邓 on and of agonist)prolif．eration endothelial migration progenitor theroleof andthe toits cells(EPCs)．IVestigateE2 relationshiprec印torsubtypes mononucleaurcells 111lcord Me