高糖及不同浓度胰岛素对大鼠肝星状细胞活化及增殖影响.pdfVIP

高糖和不同浓度胰岛素对 大鼠肝星状细胞活化和增殖的影响 摘 要 目的：观察高糖、不同浓度胰岛素对大鼠肝星状细胞(Hepatic Stellate Cell，HSC)增殖、p65蛋白量表达的影响，进一步探讨糖尿病 性肝纤维化的发生机制，为临床糖尿病性肝纤维化的治疗提供更佳方 案。方法：用不同浓度胰岛素、单纯高糖及高糖加胰岛素作为刺激因 子，以甘露醇作为高渗透压对照、5．6mmol／L葡萄糖作为正常对照组， 脱察体外培养大鼠HSC在不同刺激因子作用下的动态变化。具体每 (25 D：高糖(25 +中胰岛素组(10‘8mol／L)、F：高糖(25mmol／L)+中胰岛素组 H：高糖(25 (25mmol／L)。在以上每组刺激因子作用下，大鼠HSC连续外培养24、 Kit一8 48、72小时。①在培养24、48、72小时后，通过Cell Counting (CCK．8)法检测HSC的增殖情况并绘制生长曲线。②24小时后用 免疫印迹法测定各组HSC p65蛋白量的表达。结果：培养24小时， 与A组相比，各组吸光度值变化不大，差异无统计学意义(PO．05)。 48小时后，与A组值相比，C组和E组吸光度值显著升高，差异有 变化，差异无统计学意义(PO．05)。72小时后，与A组相比，F、 G、H、I组吸光度值明显升高，有统计学意义(尸O．05)，B、C、 D、E组吸光度值无明显变化，无统计学意义(尸O．05)。②免疫印 A 岛素、高糖、胰岛素加高糖作用于大鼠HSC后p65蛋白量的表达与 表达明显增加(尸O．01)，单因素分析显示，各组p65蛋白表达量随 着胰岛素浓度升高也显著增多，并呈线性相关(尸O．01)；与A组 岛素、高糖胰岛素加高糖分别可诱导体外培养的大鼠HSC激活，p65 蛋白表达的增加，但HSC数目增殖不明显，加入高糖胰岛素后高糖 对HSC增殖作用不再增加。2、NF．r,B信号通路参与了HSC的激活。 关键词：肝纤维化；NF．KB；胰岛素；肝星状细胞；P65 onthe Concentrations InsulininDifferent EffectsofGlucoseand ActivationofHSCinRat Proliferationand themechanismand investigate provide Abstract：Objective：To for fibrosiscaused diabetes， betterclinicaltreatment hepatic by Program onthe indifferentconcentrations theeffectsof andinsulin glucose