高胰岛素水平及高LHFSH比值对颗粒细胞卵泡膜细胞的作用.pdfVIP

高胰岛素水平和高LH／FSH比值对颗粒细胞／卵泡膜细胞的作用 中文摘要 高胰岛素水平和高LH／FSH比值对颗粒 细胞／卵泡膜细胞的作用 硕士研究生：曾海涛 导 师：粱晓燕副教授 中山大学附属第一医院妇产科 摘 要 1．研究目的 为探讨高胰岛素水平和高LH／FSH比值对颗粒细胞／卵泡膜细胞的作用，以 及它与PCOS卵泡发育停滞的可能关系。采用双池共培养系统来模拟颗粒细胞和 卵泡膜细胞在体内的环境，观察LH／FSH比值和胰岛素升高时，对PCOS及对照 组颗粒细胞／卵泡膜细胞合成分泌甾体激素的影响，及对颗粒细胞和卵泡膜细胞 FSH受体、LH受体、胰岛素受体、类胰岛素样生长因子I受体的mRNA表达的 影响。从而揭示PCOS发病中高u{但SH及高胰岛素作用的病理生理机制。 2．材料和方法 2l 研究对象：PCOS患者共12例作为研究组，诊断采用2003年鹿特丹制定 的PCOS诊断标准。选取15例月经正常及内分泌检查正常患者作为对照组。 2．2细胞培养：收集卵泡液，共32个，分离出颗粒细胞和卵泡膜细胞进行双池 共培养和卵泡膜细胞单独培养，共27例，分组如下： a IU／L) 7L(正常LH／FSH比值组)：加入FSH(5IU／L)、LH(5 IUtL) IUIL)、LH(25 b孔(高LH／FSH比值组)：加入FSH(5 c孔(胰岛素组) ：加入Insulin(20ng,／m11 d孑L(高LH／FSH比值+胰岛素组)：加入FSH(5RJ／L)、LH(25IU／L)、 Insu[in(20ng／m1) 2．3激素检测：采用微粒子酶联免疫发光法检测卵泡液和培养液中的FSH、LH、 高胰岛素水平和高LH／FSH比值对颗粒细胞，卵泡膜细胞的作用 中文摘要 竞争ELISA法检测卵泡液和培养液中的A。 24 RT-PCR及设内对照13．actin半定量检测受体mRNA的表达。 2．5统计方法：采用SPSSl0．0统计软件进行数据分析，p≤o．05为有显著性意义。 3．结果 3．1 PCOS卵泡液中激素和相关蛋白因子的水平 00mm 91±1 vs8．75± PCOS组和对照组所取卵泡的直径无显著性差异(7 1 81±2131U／L 82mm，p=0．116)。PCOS组卵泡液中LH的水平显著高于对照组(3 vsl．71±O vs 01)，P的水平高于对照组(94．70± ±373．39ng／ml 212．404-205．42ng／m1．p0 vs57 057)，而对照组卵泡液中IGF—II的水平高 62．24ng／ml70+36．48ng／ml，p=0 于PCOS组(516．11 VS 4-33949ng／ml 液中胰岛素、FSH、E2无差别 卵泡液中IGF．II的水平与卵泡直径的大小呈正相关(Pearson相关系数为 0 01)，并与卵泡液中E2的水平呈正相关(Pearson相关系数为0．4， 87，pO 05)。 卵泡液中LH的水平与A的水平(Pearson相关系数为o01)和A／E2