高血压基因组扫描及去甲肾上腺素转运蛋白、缓激肽β2受体基因多态性及高血压关系的研究.pdfVIP

·中文论著摘要· 高血压基因组扫描及去甲肾上腺素转运蛋白、缓激肽 B2受体基因多态性与高血压关系的研究 背景和目的 高血压是严重危害人类健康的常见复杂疾病之一，已成为世界范围的重要的 公共卫生问题。在我国其发病率高、致残率高、致死率也高，是脑卒中、冠心病 的危险因素。目前认为，高血压是多种遗传因素和环境因素以及基因．基因间，基 因．环境间相互作用的结果，具有遗传异质性，延迟显性及种族差异等特征。研究 表明血压变异的30％．50％受到遗传因素的影nl；jt¨，而这些遗传因素包括多个基因 的作用，每个基因的作用可能是微效的。如果能对高血压相关基因多态性与高血 压的相关性进行研究，确定与高血压相关的位点，就可以通过基因分子生物学等 方法对高血压及其相关疾病采取早预防早诊断和早治疗等措施，对患者、患者家 庭及社会都具有极重要的意义。 一般认为微效基因作用模式在原发性高血压(EH)的遗传机制中起主要作用， 即来自多个位点的大多数风险等位基因在群体中的发生频率都很低，它们之间通 过数量性状的剂量．效应关系进行相互作用，达到疾病发生的临界阈值，共同决定 EH的遗传易感性。目前对高血压遗传研究尚无既定的方法模式，其中主要的几种 策略如候选基因克隆、定位候选基因克隆与全基因组扫描、中间表型、动物模型 及比较基因组学等。 EH相关的基因多存在于‘肾素．血管紧张素．醛固酮系统(RAAS)、交感神经系 统、内皮系统和某些信号通路等系统中。交感神经反应性增强与高血压的形成密 切相关。交感神经系统基因多态性与高血压的关系成为研究的热点之一。激肽释 放酶．激肽系统(KKS)是机体重要的调节系统，广泛地存在于许多组织和器官中， 参与多种生理和病理生理过程，如心血管、肾脏和神经系统的功能调节，平滑肌 收缩、葡萄糖代谢、细胞增殖、炎症与疼痛及休克过程等。近年来特别是在心血 管方面的研究进展很快，许多临床研究和基础实验已证实KKS具有强大的心血 管保护作用，如调节血压、抑制心肌肥厚的形成、减少缺血再灌注损伤和参与缺 血预适应形成。KKS对于增加肾血流及Na+排出具有十分重要的意义。本实验 通过全基因组扫描筛查原发性高血压的相关基因位点，并对交感神经系统的去甲 肾上腺素转运蛋白基因及激肽释放酶．激肽系统的缓激肽p2受体基因多态位点与 高血压的关系进行分析，为高血压的发病机制研究提供线索。 研究方法 l、高血压家系及对照组的采集、流行病学问卷调查 在辽宁省阜新地区筛选两代或三代以上有高血压的家系，在家系中选择高血 家系非高血压健康人群作为对照组(n=380)，对两组人群进行流行病学问卷调查。 2、体格检查 对收集的研究对象进行血压、身高、体重、腹围的测量。 3、采外周血行实验室检查及DNA提取 对研究对象行外周血的采集，黄色生化管进行血液生化检查，紫色抗凝管行 基因组DNA的提取。 4、DNA浓度测定及DNA混合池构建 用nano．drop分光光度仪对己提取的DNA进行浓度测定，每份样本分别抽取 100ng，在高血压组(可用样本740份)和非家系非高血压组(可用样本361份) 分别构建DNA混合池14个。 5、全基因组扫描 SNP6．0芯片(上海晶泰生物技术有限公司)对DNA混合样 采用Affymetfix 本行全基因组扫描，定位SNP位点。 6、目的基因多态性分析 SNP6．0芯片不 用聚合酶链式反应(PCR)，Sanger测序等方法对Affymetfix 包含的四个位点，即交感神经系统的去甲肾上腺素转运蛋白基因的rsl805067和 rs2397771两个SNP位点多态性及激肽释放酶．激肽系统的缓激肽p2受体基因的 实验结果 l、高血压组收缩压、舒张压、体重指数、血肌酐和饮酒百分率高于对照组， 年龄低于对照组，差异有显著性；高血压组总蛋白、白蛋白、TC、HDL．C、LDL．C、 TG、FPG和吸烟百分率均与对照组无显著性差异。 10一。 血压组G占100％，A占0％，在对照组G占100％，A占O％，两组问没有差异 对照组G占61．19％，C占39．81％，两组间有显著性差异(P0．05)。 对