基于UPLC-ESI-QTOF-MSMS技术检测龟甲胶中新阿胶成分.pdfVIP

2017 第十九卷 第二期 ~-Vo1．19No．2 基 于UPLC．ESI．QTOF—MS／MS技术检测龟 甲胶 中新阿胶成分六 唐 敏 ，严建业 ，徐 博 ，赵小芳 ，王学生 ，李顺祥 (1．湖南中医药大学药学院 长沙 410208；2．湖南省中药活性物质筛选工程技术研究中心 长沙 410208；山东一笑堂阿胶集团百年制药有限公司 新蔡 463500) 摘 要：目的：检测龟甲胶中新阿胶特征肽成分。方法：采用胰蛋 白酶进行酶解，利用超高效液相色谱一电 喷雾四极杆飞行时间质谱法(UPLC—ESI—QTOF—MS／MS)对龟甲胶样品进行测定，选定新阿胶特征肽 离子m／z 925．4作为检测离子。结果：龟甲胶特征成分含量偏低的样品(但不含有牛皮元和驴皮元特征肽成分)中检测出 新阿胶特征肽离子mz／925．4信号，其MS／MS裂解规律与文献报道一致，而龟甲胶标准品中未检测出该特征肽 信号。结论：该方法专属性强、灵敏度高，可检测出龟甲胶中是否掺杂新阿胶成分，可用于龟甲胶的质量控制。 关键词：UPLC—ESI—QTOF—MS／MS 新阿胶 龟甲胶 肽段 doi：10．11842／wst．2017．02．024 中图分类号：R283．3 文献标识码 ：A 根据2015版中国药典记载，龟 甲为龟科动物乌龟 标准中药成方制剂》第 19册。由于猪皮资源比较丰 Chinemysreevesii(Gray)的背甲及腹 甲，龟 甲胶是龟科动 富，且价廉易得，从而常被不 良商家作为原料用于生产 物乌龟的背甲及腹 甲经水煎煮、浓缩制成的固体胶。 其他胶类以牟取暴利。同时从一些宗教信仰层面考 龟甲胶在历版 《中国药典》中均有收载，是中国名贵药 虑 ，掺杂了新阿胶的其他胶类在消费和使用方面也受 材。其味甘、咸 ，性平，归肝 、肾经，可滋阴，补血 ，主 到一定限制 l。根据不同动物的同类型胶原蛋 白的氨 治阴虚潮热、骨蒸盗汗、腰膝酸软、血虚萎黄。近年来 ， 基酸序列存在差异 ，其胰蛋 白酶水解产物所含肽段 由于其价格昂贵，以致乌龟被过度捕杀，其资源面临严 之 间存在差异性 。利用 蛋 白质酶切技术和基 于 重短缺。诸多报道称，一些不 良厂家为了节省成本，利 HPLC—MS的多肽识别技术，找 出这种差异 ，是鉴别胶 用其它来源的动物甲壳和皮革为原料来生产龟甲胶 ， 类药材的关键所在 。。近年来 ，该分析方法 日趋成 其中包括在原料中掺杂猪皮来生产龟 甲胶的情况。 熟 ”，而被广泛用于胶类制剂的检测。现行的 《中国 胶类药材是指由动物的皮革、骨骼等加工而成的 药典》及其补充批件中对龟甲胶的检测项 目只对龟甲 胶原蛋 白水解肽 。近年来 ，胶类物质在世界范围内 胶特征肽、牛皮元特征肽和驴皮元特征肽的检测有要 均被广泛使用 ，据相关报道数据分析 ，胶类产品每年 求，但未包括新阿胶特征肽的检测项 目。在龟 甲胶的 生产量已超32万吨，其中猪皮胶的产出就 占据46％。 实际检测工作中发现部分不合格产品中虽可检测出龟 猪皮胶亦称新阿胶 ，是动物猪Js scrofadomesticaBrisson 甲胶特征肽，且该产品中未检测出牛皮元和驴皮元特 的皮去毛熬制而成的胶块，其标准收载于 《卫生部药品 征肽，但龟甲胶特征肽含量偏低，此时应考虑是否掺杂 新阿胶成分的情况。据文献报道[12-141，新阿胶经酶解 收稿 日期 ：2016—1卜13 修 回日期：2016—12—10 ★ 国家中医药管理局 “药用植物学”重点学科课题 (国中医药~X．[2OO913O号)，负责人 ：李顺祥；湖南省教育厅 “中药学”重点学科(湘教通[2O11]76 号)，负责人：李顺祥；湖南省教育厅高校科技创新团队(湘教通[201O]212号)，负责人：李顺祥。 ★★ 通讯作者：李顺祥，本刊编委，博士，教授，博士生导师，主要研究方向：中药成分与资源研究。 [WorldScienceandTechnology~ModernizationofTraditionalChineseMedic