人卵巢癌细胞系A2780中肿瘤干细胞的分离培养及鉴定.pdfVIP

人卵巢癌细胞系A2780中肿瘤干细胞的分离培养与鉴定 中文摘要 目的肿瘤干细胞具有无限增殖和多向分化的能力，具有高致瘤性和抵抗放化疗的 特点，是恶性肿瘤复发和转移的根源。卵巢癌的特点是易于产生耐药和复发，高度 提示可能存在肿瘤干细胞。本研究采用无血清悬浮培养法，从人卵巢癌细胞系A2780 中分离培养卵巢癌干细胞球体，并对其特性进行鉴定。 方法将人卵巢癌细胞系A2780制成单细胞悬液，悬浮于特殊配制的无血清培养基 free (serum medium，SFM)中获得肿瘤细胞微球体，流式细胞仪检测细胞表面标志 能力；CCK．8检测微球体细胞的增殖能力，比较两种细胞的倍增时间；将肿瘤微球体 置于含有血清的培养基中使其诱导分化，并观察其形态学的变化。 结果人卵巢癌细胞系A2780可在SFM中存活、增殖，形成悬浮生长并稳定传代 的肿瘤细胞微球体，与正常贴壁的肿瘤细胞相比，此微球体高表达干细胞标志CD44、 血清环境下诱导分化为普通的卵巢癌细胞。 结论用含有生长因子的SFM悬浮培养人卵巢癌细胞系A2780可获得卵巢癌细胞 微球体，实验证实，此细胞球体中富集有肿瘤干细胞。 硕士研究生s刘佳(妇产科学) 导 师：纪新强教授 关键词：卵巢癌；肿瘤干细胞；无血清培养基；悬浮培养 tumotstem humanovarian Isolationandidentificationof cellsfrom carcinomacelllineA2780 ABSTRACT tumorstemcellshavethe ofunlimited and objective：The ability proliferationmultiple as and characteristicssuch proliferation,have tligll tumorigenicity are forthe andmetastasisofthecarcinoma．The resistance，whichresponsiblerelapse featuresof canoerare and is indicative theovarian drug-resistantrelapsing,whichhighly ofexistenceoftumorstemcellinit．Inthis toisolateandcultivate study,we prepare ovarian cellsfromhumanovariantumorcelllineA2780andto their tumorstem identify biologicalproperties． into tumor in Methods：CellsA2780weredissociated single cells，suspendedspecific s廿unl-free orderto ovariantumorstemcell