人白细胞介素-24基因重组质粒对宫颈癌Siha细胞裸鼠皮下移植瘤生长的作用.pdfVIP

山两医科人学坝l：学化论义 中文摘要 子宫颈癌(cer、，icalcancer，CC)是严重危害广大妇女健康的最常见的恶性肿瘤之一， 其发病率和死亡率仪次于乳腺痛而位居第二。目f{{『，子宫颈癌的治疗主要是手术切除、放 疗、化疗为主，但这些治疗手段并没有明显改善患者的5年生存率，因此探索新的宫颈癌 的治疗方法显得尤为重要。近年来肿瘤的基因治疗已成为研究者们关注的焦点，研究表明 IL．24基冈是一种理想的能够抑制肿瘤生长而对正常组织细胞无明显抑制作用的新基冈， 国内外埘IL．24在宫颈癌治疗方面的研究不多见，为此我们设计了此实验。 目的：探讨hIL．24基因重组质粒对宫颈癌Siha细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及作用机 制。 方法： 1． 细胞培养 常规方法复苏Siha细胞，接种于含10％胎牛血清的MEM培养液的培养瓶中进行培养； 2．建立荷宫颈癌Siha细胞裸鼠皮下移植瘤模型 长期的Siha细胞，在无菌环境下以1×107／只密度接种于裸鼠皮下，观察裸鼠移植瘤生长情 况及裸鼠一般状况； 3．hIL．24基因对人宫颈癌裸鼠移植瘤的影响 将成瘤裸鼠随机分为三组(IL．24重组质粒组，空质粒组，PBS组)，每组五只，成瘤 裸鼠移植瘤的尘长变化及裸鼠一般状况，测量肿瘤的长径(L)和短径(W)，计算肿瘤体 积，并根据肿瘤体积的生长情况绘制肿瘤生长曲线； 4．肿瘤内术次注射脂质体包裹质粒后七天断颈处死裸鼠，切耿瘤体并称重，计算肿 瘤抑制率； 5．用RT-PCR方法鉴定三组移植瘤细胞中IL．24mRNA的表达情况 泳； 6．用流式细胞仪检测移植瘤组织细胞周期 山两仄科人学修!Ij学位论义 将肿瘤组织剪碎成组织匀浆，胰蛋白酶消化，经乙醇固定、加RNase酶消化、碘化丙 叮(PI)处理后制成单细胞悬液，上流式细胞仪(FCM)分析。 结果： 1．成功构建了人宫颈癌Siha细胞裸鼠皮下移植瘤模型，接种细胞后八至十天15只裸 鼠皮下肿瘤直径均达0．5cm，肿瘤移植成功率达100％； 2．生长曲线图表明IL．24基因重组质粒组移植瘤的体积明显小于空质粒组和PBS组， 植瘤，卜长曲线几乎平行； 空质粒埘肿瘤无抑制作用； 在620bp的位置可观察到一特异性条带，而空质粒组和PBS对照组均未出现此预期的条 带； 5．各组移植瘤细胞经流式细胞术检测表明：与空质粒组和PBS组比较，IL．24基冈重 结论： 1．IL．24基因重组质粒具有抑制宫颈癌Siha细胞裸鼠移植瘤生长的作用； 2．IL．24基因重组质粒能够将宫颈痛Siha移植瘤细胞阻滞于Go／GI期。 关键词： hIL．24重组质粒，宫颈癌，移植瘤 山两医科人学坝I：学位论义 ABSTRACT Cervicalcancerisoneofthe killersofwomen rateand biggest worldwide．Morbidity rateare to second breastcancer．At treatmentofcerVicalcanceris mortaIity only present，the butthesetreatmentshaVenot mainlysu曙ery，radiotherapy，chemotherapy， signincantly suⅣiValrateof recent forcancerhasbecomea improVed5一year