人脐带MSCs移植对不可逆性梗阻性肾损伤模型大鼠治疗作用的探究.pdfVIP

目 录 中文摘要……………………………………………………………………．1 英文摘要……………………………………………………………………．4 英文缩写……………………………………………………………………．8 研究论文人脐带MSCs移植对不可逆性梗阻性肾损伤模型大鼠治疗 作用的研究 前言………………………………………………………………………………………．9日U舌…………………………………………………………………………………………… 材料与方法……………………………………………………………．9 结果…………………………………………………………………………………………．16 附图……………………………………………………………………19 附表………………………………………………………………………………28 讨{仑…………………………………………………………………………………………．31 结论…………………………………………………………………………………………．36 参考文献………………………………………………………………37 综述MSCs对肾脏缺血再灌注损伤改善作用的研究进展……………41 致谢………………………………………………………………………………．．52 个人简历……………………………………………………………………53 万方数据 中文摘要 人脐带MSCs移植对不可逆性梗阻性肾损伤模型大鼠治疗作用的 研究 摘 要 目的：从形态学及细胞免疫表型两个方面评判组织块贴壁法分离人脐 带MSCs的可行性及生化功能的完好性，从生化指标(血胱抑素C、血肌 化相关蛋白的表达水平三个不同角度研究人脐带MSCs移植对不可逆性 梗阻性肾损伤的治疗和改善作用，为人脐带MSCs在梗阻性肾病的临床应 用提供进一步的实验和理论支撑。 方法： 1运用组织块贴壁法分离新鲜脐带的MSCs，在光镜下观察提取的人 脐带MSCs的细胞形态，运用流式细胞检测仪测定细胞的免疫表型。 2选取清洁级大鼠90只，随机分成模型组(单侧输尿管梗阻组，n-30， 大鼠行右侧输尿管结扎术，术后10天尾静脉注射生理盐水lml)，治疗 手术组，n=30，分离右输尿管但不结扎输尿管，术后10天经尾静脉注生 个时间点各取10只，抽血后处死取肾标本，行血胱抑素C水平、血肌酐 纤维化相关分子在WesternBlot检测中的表达水平的研究。 Statistics 3实验所得数据用SPSS 19软件进行统计学处理，其中计量 资料以均数±标准差(夏±s)表示。检验标准为P=0．05。 结果： 1组织块贴壁法提取的人脐带MSCs，在显微镜下可观察到与成纤维 而不表达CDl9、CD34、CD45、CDl16及mA—DR，其免疫表型符合人 间充质干细胞特征。 2在人脐带MSCs移植后不同时间点，模型组和治疗组大鼠同组间测 万方数据 中文摘要 得的血肌酐值和血胱抑素C水平均有显著差异(尸O．05)，而在同一时 间点三组间的这两项指标亦有明显的差异(PO．05)。 3在人脐带MSCs移植后不同时间点，治疗组与模型组的肾组织病理 改变均表现为明显的肾小管空泡样扩张、炎性细胞浸润和间质纤维化改 变。组织病理学评分方面，模型组在移植后早期相对较轻，而2W后则持 续恶化(尸O．05)。此外，治疗组病理损伤严重程度明显较同一时间点的 模型组轻，但是在2W后也出现恶化趋势(尸O．05)。 4模型组VEGF蛋白表达水平随时间进展呈先增加后减少趋势，且 到达顶峰，之后再度出现下降且在4W时弱于同组1W时表达量(氏O．05)。 移植后1W时的表达量最高，往后随时间进展呈递减趋势，至移植后4W 表达水平始终较模