人脐带间充质干细胞治疗AT1-AA诱导的妊娠期高血压疾病大鼠的潜能和机制研究.pdfVIP

·中文论著摘要· 脐带问充质干细胞改善血管紧张素受体自身抗体所诱 导的妊娠期高血压疾病的潜能及机制的研究 背景 disorder 妊娠期高血压疾病(Hypertensive complicating 致孕产妇及围生儿死亡的主要疾病，其病因和确切的发病机理目前仍不清楚。目 前大多数学者认为子痫前期的发病与妊娠期间母体对于来自父系抗原的免疫适应 不良引起胎盘缺氧，胎盘细胞滋养细胞浸润能力异常，螺旋动脉重塑障碍、胎盘 oxide,NO)活性 组织合成和释放大量细胞因子进入母体循环引起一氧化氮(nitric 下降，活性氧簇(reactivespecies,ROS)增加、进而导致肾脏功能受损，外 oxygen stem 周阻力增加丽引起高血压。间充质干细胞(mesenchymalcells，MSCs)因具 有免疫调节作用而起到维持免疫耐受的作用。异基因的胎儿被认为是异基因的移 植物，维持妊娠的相关耐受机制与移植耐受机制相似。 目 的 umbilicalcord-derived 研究脐带来源的间充质干细胞(human mcsenchymal stem cells，HU-MSCs)对血管紧张素受体自身抗体诱导的妊娠期高血压疾病模型 大鼠的治疗作用及机制，为HU-MSCs对妊娠期高血压疾病的临床治疗提供理论依 据和实验基础。 方法 i、建立酶消化法和组织块培养法分离培养HU-MSCs，对细胞的一般形态、 fluorescence 免疫表型进行鉴定，应用含绿色荧光蛋白的慢病毒(1entiviralgreen l，HO·1)在HU-MSCs中的表达情况。 oxygenase II l 2、大鼠源性的血管紧张素Ⅱ1型受体(AngiotensintypeReceptor,ATlR)第 二胞外环的多肽片段偶联血蓝蛋白(Keyholelimpet 4B 对大鼠进行免疫16W，使用溴化氰活化琼脂糖凝J菠4B(Sepharose CNSr)亲和纯 autoantibodies, 化血管紧张素受体自身抗体(Angiotenstnreceptoragonistic ATl叫～A)，采用心肌跳动频率的变化鉴定所得的抗体，HE染色和PAS染色观察肾 脏的病理改变。 d和14 3、大鼠妊娠12 d尾静脉注射ATl-AA,造成妊娠期高血压疾病大鼠模型。 在相应妊娠天数注射0．9％生理盐水的正常妊娠大鼠(NP组，n=6)。应用免疫荧光 切片技术检测注射后的LV-GFP标记的HU-MSCs在大鼠肾脏、胎盘和三角区以及 胎鼠心脏、肺脏、肾脏和肝脏中的分布。妊娠第ll、15和19d采用无创尾静脉大 鼠血压仪检测大鼠血压。妊娠第20d处死大鼠，检测删．MSCs对胎鼠体重，胎鼠 肾脏和肝脏发育情况，大鼠肾脏病理，螺旋动脉重塑的影响，并且检测肿瘤坏死 necrosis 因子a(tumor a，TNF-仅)、自介素10(interleukin10，m-10)和HO-l因子的 变化。