固体脂质纳米粒在提高长春西丁口服生物利用度的应用研究.docVIP

固体脂质纳米粒在提高长春西丁口服生物利用度的应用研究 摘要： 目的：以单硬脂酸甘油脂为载体，采用超声溶解-乳化技术制备具有狭窄粒径分布的长春西丁纳米分散制剂。方法：采用超声溶解-乳化技术制备出纳米粒，操作在50摄氏度下进行以增加脂质的载药能力。分别对长春西丁固体脂质纳米粒的平均粒径分布、平均小滴分布、载药量、包封率、zeta电位、长期物理稳定性进行了细致的研究。利用透析袋对两种长春西丁固体脂质纳米粒的体外释药进行研究。药动学研究采用小白鼠进行操作，分别给小白鼠以10mg/kg口服不同剂型的长春西丁制剂，结果发现长春西丁固体脂质纳米粒的相对生物利用度明显高于长春西丁溶液。表面活性剂的比例对长春西丁固体脂质纳米粒的口服吸收有显著的影响。我们对长春西丁固体脂质纳米粒的口服吸收机制进行了讨论。结果：利用固体脂质纳米粒能显著提高长春西丁的吸收。结论：固体脂质纳米粒可以提高水难溶药物的口服生物利用度。 1.背景介绍： 研究报道[1]，相对于传统的聚合纳米粒，固体脂质纳米粒是一种新型的药物给药系统。固体脂质纳米粒比聚合纳米粒有一个明显的优点，那就是：固体脂质纳米粒的脂质骨架采用生理相容性的脂质材料，这种脂质材料降低了急性和慢性毒性的可能[2]。在室温下，固体脂质纳米粒以固体状态存在[3～4聚氧乙烯蓖麻油聚氧乙烯蓖麻油 表1 制剂各组分的组成 2.3 载药量和包封率 取1ml长春西丁固体脂质纳米粒，过Sephadex G-50色谱柱，收集带微蓝色乳光馏分25ml。取馏分2ml，用3ml四氢呋喃溶解，加洗脱液至10ml定容。涡漩沉淀脂质，4000r/min离心15分钟，取上清液高效液相测定浓度。高效液相由泵（LC-10AD；SHIMADZU，Japan）、紫外-可见监测器（SPD-10A；SHIMADZU，Japan）、20微升定量环（Rhenodyne model 7725i（Hypersil ODS C18，200Phenomenex C18预柱（4mm×3.0mm（83︰17，v/v）（Load content）（Entrapment efficiency） Ws:固体脂质纳米粒中长春西丁的质量；Wtotal：制剂中长春西丁的质量；Wlipid：载体的质量。 2.4 长春西丁固体脂质纳米粒的性质 2.4.1 粒径大小和zeta电位 固体脂质纳米粒的平均粒径用带激光散射仪的光子相关光谱固定角度为90度在25摄氏度下测量，以体积分布来表示粒度分析数据。在同一温度下用电位分析仪(Delsa 440SX; BECKMAN COULTER)测定Zate 电位。 用预先配制的原始稀释溶媒将固体脂质纳米粒分散液稀释到50倍以利于粒径和电位的测定。重复以上测定操作三次。 2.4.2 透射电子显微镜 用投射电子显微镜检查固体脂质纳米粒的形态(Hitachi H-100; Japan)，用配制的原始稀释溶媒稀释50倍后，用15％的磷乌酸脱色观察。 2.4.3 稳定性研究 将SLN A和 SLN D两处方注入10ML安剖中密封，4℃保存一年。分别测定平均粒度、Zate电位，包封率 2.5 长春西丁固体脂质纳米粒的药物释放机制 药物分别从VIN-SLN A, VIN-SLN B 和长春西丁溶液剂释放是用透析袋中加入0.1mol HCL蒸馏水（PH6.5）和磷酸缓冲溶液（PH7.4）透析液中进行。透析袋能截留纳米粒而使药物进入到溶解介质中with a cut-off of 8000—14000。使用前，将透析袋在超纯水中浸泡12小时。将两毫升的固体脂质纳米粒分散液（1.0mg/ml）加入到透析袋中，袋子两端用夹子固定。将袋子放入到装有50ML接收液的锥形瓶中。然后将锥形瓶放到恒温摇床上（HZQ—C，哈尔滨东明制药有限公司，哈尔滨，中国），摇床工作条件设为37℃，140次每分钟。分别在1、2、4、8、12、24、36、48、60、72、96小时测定，每次测定后将锥形瓶中的溶液换成新鲜的溶液以维持水槽的条件。滤出液用高效液相色谱法分析。以上步骤重复操作3次。 2.6口服给药 实验对象：母Wistar小鼠（中国药科大学动物中心提供），250±20g。所有动物实验操作均遵守中华人民共和国动物实验法定规定进行。实验前，所以的小鼠都禁食12小时，只喂水。用乙醚轻度麻醉后，通过灌胃的方法将长春西丁固体脂质纳米粒A、B和溶液剂按10mg/kg的剂量给6只小鼠给药。 分别于给药后0、0.25、0.5、1、1.5、2、3、4、6、8和12小时后尾静脉取血0.5ML。血样放到肝素化的试管中快速离心分离。离心后得到的血浆在-20℃条件下保存用于分析。 2.7.血药浓度测定 如上所述，用高效液相色谱法分析长春西丁的血药浓度。往具塞分析试